LIMA激光波長(zhǎng)可調(diào)的高光譜顯微鏡，400-2500nm，光學(xué)分辨率<5nm
加拿大Photon ect.的LIMA可調(diào)高光譜成像系統(tǒng)規(guī)格：
| 光學(xué)規(guī)格 | LIMA | ||
| 光學(xué)規(guī)格 | VIS400-1000nm | SWIR900-1620nm | e-SWIR1000-2500nm |
| 光學(xué)分辨率（FWHM） | 1.5-2.5nm | 3.0-5.0 | <5.0nm |
| 光譜通道 | 帶外抑制：<-60dB@±40nm | 帶外抑制：<-60dB@±80nm | |
| 空間分辨率 | 亞微米（受到光譜顯微鏡NA的限制） | ||
| 相機(jī) | sCMOS | InGaAscamera (ZephIR™1.7orAlizé™1.7) | HgCdTecamera |
| 激發(fā)波長(zhǎng)（高達(dá)3個(gè)） | 連續(xù)可調(diào) | ||
| 顯微鏡特點(diǎn) | 科研級(jí)別的產(chǎn)品，可正放或倒放 | ||
| 波長(zhǎng)分辨率精度 | FWHM/8（<0.7nm） | ||
| 掃描速度 | 20-50ms穩(wěn)定時(shí)間(步距0.01-10nm) | ||
| XY方向的行程 | 76mm×52mm（搭配手動(dòng)臺(tái)） | ||
| Z軸分辨率 | 100nm | ||
| 白光照明 | 透射、反射，汞、鹵素 | ||
| 照明選項(xiàng) | 高效率均勻光照明； | ||
| 數(shù)據(jù)處理 | 空間濾波，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，光譜提取，數(shù)據(jù)歸一化，光譜標(biāo)定，光譜疊加，中心位置圖 | ||
| 軟件配置 | 電腦（Windows10-64bits）,PHySpec™控制分析軟件（含電腦） | ||
| 重量 | ≈80kg(總重量220磅，凈重180磅) | ||
| 尺寸 | 顯微鏡：31×85×82cm | ||
加拿大Photon ect.的LIMA可調(diào)高光譜成像系統(tǒng)附件及可選項(xiàng)：
| 20×，40×，50×，60×，100×（5×，10×規(guī)格可定制） | ||
| 機(jī)械電動(dòng)臺(tái) | 120×75×0.15mm，分辨率22nm | |
| 濾光輪 | 6個(gè)帶通濾波器 | |
| 第二相機(jī)的接口； | ||
| 光學(xué)臺(tái)建議搭配氣升式防震臺(tái)：900mm×1800mm×60mm（36”×72”×2.4”）或900mm×900mm×60mm（36”×36”×2.4”）光學(xué)臺(tái)緊挨著標(biāo)準(zhǔn)的900mm×900mm×60mm（36”×36”×2.4”）光學(xué)臺(tái) | ||
Photon等為高光譜暗場(chǎng)成像提供了兩種方式：可調(diào)諧激光源(TLS)允許在激發(fā)中過(guò)濾，而IMA是提供發(fā)射過(guò)濾的平臺(tái)。TLS由兩個(gè)模塊組成：超連續(xù)譜激光器和基于Photon的體積布拉格光柵（VBG）技術(shù)的激光線(xiàn)可調(diào)濾波器（LLTF帶通濾波器）。IMA由高光譜成像濾波器、高光譜模塊濾波器組成，也基于VBG技術(shù)。當(dāng)與配備暗場(chǎng)聚光鏡的科研級(jí)顯微鏡結(jié)合使用時(shí)，TLS和高光譜模塊濾波器可以將該顯微鏡轉(zhuǎn)變?yōu)楦吖庾V暗場(chǎng)設(shè)置。這些系統(tǒng)可在VIS(400-1000nm)、NIR(900-1620nm)或兩者(400-1620nm)光譜范圍內(nèi)連續(xù)可調(diào)。這種的平臺(tái)允許對(duì)納米材料進(jìn)行深入表征，而無(wú)需任何特殊的樣品制備。
波長(zhǎng)可調(diào)的高光譜顯微鏡是一種高光譜成像系統(tǒng)，也叫作可調(diào)高光譜成像系統(tǒng)、可調(diào)激光源的高光譜成像系統(tǒng)、激光波長(zhǎng)可調(diào)的高光譜顯微鏡。
TLS法得到的結(jié)果：下圖為使用高光譜暗場(chǎng)成像研究的靶向CD44+人乳腺癌細(xì)胞的金納米粒子(AuNP)顯示的3D圖像，此類(lèi)空間和光譜信息對(duì)于改進(jìn)復(fù)雜生物環(huán)境中基于納米等離子體的成像、疾病檢測(cè)和治療至關(guān)重要。該設(shè)置已成功用于在固定細(xì)胞制劑中對(duì)CD44靶向AuNP進(jìn)行3D光譜定位和光譜鑒定。
上面a圖代表100×物鏡的焦平面在玻璃基板表面上時(shí)的暗場(chǎng)圖像，b圖代表100×物鏡的焦平面在人類(lèi)乳腺癌細(xì)胞的頂面或細(xì)胞內(nèi)部時(shí)的暗場(chǎng)圖像。
上圖表示使用Photon等公司的高光譜暗場(chǎng)成像儀研究以3nm的步長(zhǎng)從432nm到849nm改變激發(fā)波長(zhǎng)，100nm金納米粒子的散射數(shù)據(jù)。圖a和圖b顯示了從數(shù)據(jù)中提取的高光譜結(jié)果，它對(duì)應(yīng)圖c(典型的散射光譜)。波長(zhǎng)的變化可以幫助識(shí)別粒子的大小，空間信息可以幫助評(píng)估它們的分布。
IMA法：使用60X物鏡，150x112μm2的區(qū)域在400nm到650nm范圍內(nèi)成像，步長(zhǎng)為2nm，曝光時(shí)間為2秒。每個(gè)波長(zhǎng)。在幾分鐘內(nèi)，獲得了超過(guò)一百萬(wàn)張光譜，每張光譜都覆蓋了整個(gè)可見(jiàn)光范圍。
上圖中，圖a中AuNps（60nm大小）標(biāo)記的人乳腺癌細(xì)胞的暗場(chǎng)圖像，圖b中綠色代表550nm處AuNP金納米粒子的單色圖像。圖c代表細(xì)胞放大圖，圖d代表含有AuNP的區(qū)域的光譜，這證實(shí)了60nm納米顆粒的存在。
那我我們的高光譜系統(tǒng)存在哪些優(yōu)勢(shì)呢？
相比常規(guī)的近紅外一區(qū)（700-900nm，NIR-I）熒光成像，近紅外二區(qū)（1000-1700nm，NIR-II）熒光成像優(yōu)勢(shì)很多，比如，其自發(fā)背景熒光較低，激光進(jìn)入組織后穿透性更強(qiáng)，具有較高的信背比，且生物檢測(cè)的安全性更高。
系統(tǒng)支持暗場(chǎng)、或標(biāo)準(zhǔn)明場(chǎng)反射和透射成像，比逐點(diǎn)或基于線(xiàn)掃描的系統(tǒng)更快。
Photon ect.的LIMA可調(diào)激光源的高光譜成像系統(tǒng)特點(diǎn)：
-高光學(xué)分辨率<5.0nm
-高波長(zhǎng)分辨率：FWHM/8（<0.7nm）
-高空間分辨率：亞微米（受到光譜顯微鏡NA的限制）
-科研級(jí)別的產(chǎn)品，可正放或倒放
-掃描速度快
-透射式照明、熒光照明
Photon ect.的LIMA激光波長(zhǎng)可調(diào)的高光譜顯微鏡應(yīng)用：
-生命科學(xué)（生物化學(xué)和納米傳感器、金納米粒子暗場(chǎng)成像）
-材料科學(xué)（鈣鈦礦（CIS）、銅銦鎵硒（CIGS）、硅（Si）、碳化硅（SiC）等光譜和空間分析）
