PCR具有以下特點:
靈敏:配合推薦使用的核酸抽提方案,檢測靈敏度達到 10CFU/ml。
可靠:抽提加入內標核酸,全過程質量控制。
穩定:全程閉管操作,無交叉污染。
方便:操作簡單,無需電泳步驟。特點
1. 內控對照為獨立包裝,遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。
2. 高特異性,一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種(包括歐洲藥典規定的9種支原體)。與細菌和真核DNA無交叉反應。
3. 高靈敏度,檢測限可達到≤10CFU/ml。
4. 有相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA,便于特異性驗證。
5.有相應配套的支原體定量標準品,便于最后定量檢測。
公司產品僅供科研研究實驗!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
豬圓環病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒 | 50T | BJ-P7934 |
操作步驟:
第1步:樣本處理
a.細胞培養上清
說明:
①樣品基質可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。
②細胞培養物樣本含豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原DNA,影響檢測靈敏度。
建議:樣本做DNA抽提處理,實現靈敏度。
第2步:試劑制備
a. 凍干粉溶解
b. 反應體系制備 b1) 樣品為細胞上清篩查——反應體系制備
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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