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鏈霉親和素磁珠是一種高度均勻的超順磁性微球，表面包覆著高密度的超純鏈霉親和素（＞97%）。微球經過專門設計、測試和質量控制，可用于免疫沉淀、細胞分選、快速單步捕獲生物su化分子，如 DNA、RNA、抗體或細胞裂解物或雜交反應中的蛋白質等。鏈霉親和素（或抗生素多倍體）和生物su之間的相互作用表現出已知的高非共價相互作用之一。抗生物su、鏈霉親和素、單體抗生物su及其類似物已成為探針和親和配體的有力工具，在生化分析、診斷、親和純化和藥物傳遞等領域有著廣泛的應用。鏈霉親和素是一種四聚體生物su結合蛋白，源于鏈霉菌親和素 II，質量為 60000 道爾頓。鏈霉親和素不含碳水化合物，pI 較低，非特異性結合程度較低，使鏈霉親和素成為許多檢測系統的理想試劑選擇。

產品特點: 使用鏈霉親和素-生物su結合系統的優點和益處：

·親和力：鏈霉親和素是同源四聚體，具有較高的生物su結合親和力，具有KD~10?14 米。

·高穩定性：生物su結合復合物具有優異的穩定性，可抵抗 pH、溫度（2°C 和40°C）、苛刻的有機溶劑、變性劑（如氯化胍）、洗滌劑（如 SDS）和蛋白水解酶。

·突出的選擇性和特異性：生物su和鏈霉親和素的相互作用具有高度的特異性，確保了較低的非特異性結合。

·高靈敏度：高穩定性和特異性確保了高檢測靈敏度。

·非常靈活：生物su的小尺寸和顯著穩定性被證明非常適合相對容易地并入各種分子，例如合成聚合物、熒光團、小分子或生物分子中的特定位置，從而對共軛生物分子的結構和功能施加小的擾動。

鏈霉親和素磁性微球的優點：

·快速、簡單且一步到位的高通量程序：消除了柱狀物或過濾器，或重復費力的移液或 離心（圖 1） ·高結合能力 ·表現出較低的非特異性結合 ·可擴展-可輕松調整樣本大小和自動化

所需材料 ·

Binding Buffer: 1x PBS, 0.1% BSA, pH 7.4 ·磁力分離器（適用于手動操作）： 根據實驗時生物樣品的體積，使用者可以選擇以下不同型號的磁力分離器： 8孔磁力架 可以容納8個單獨的1.5-2.0 ml 離心管 ; 24孔磁力架可以容納24個單獨的1.5-2.0 ml離心管; 4孔磁力-15可以容納 4個單獨的15ml離心管; 4孔磁力架-50可以容納四個單獨的50 ml離心 管。

操作過程：

注: · 該方案是一種通用親和純化程序。為了獲得佳結果，每個用戶應確定純化單個目標蛋白的佳工作條件。

·根據粗樣品中目標生物su化分子的數量（基于珠子結合能力），優化每種應用中使用的珠子數量。使用過多的磁珠會導致背景較高，而使用過少的磁珠會導致產量較低。

1. 將佳量的珠子轉移到離心管中。將管放在磁力架上1-3分鐘。在管留在分離器上的同時去除上清液。

2. 取下試管，用5倍體積的 1x Binding/Washing Buffer通過渦流清洗珠子30秒。將試管置于室溫下1-3分鐘。將管放在磁力架上1-3分鐘。在管留在分離器上的同時去除上清液。

3. 重復步驟二兩次。

向含有目標分子的粗樣品中加入洗滌過的珠子，并在室溫或所需溫度下培養1-2小時（溫度越低，培養時間越長）。

注: 強烈建議進行滴定以優化培養時間。更長時間的孵育可能導致更高的背景。

4. 如步驟 2 所述清洗磁珠，直到 280 nm 處洗脫液的吸光度接近背景水平（OD280<0.05）。

注: 添加更高濃度的鹽、非離子洗滌劑和還原劑可降低非特異性背景。例如，向洗滌緩沖液中添加NaCl（高達1-1.5 M）、0.1-0.5%的非離子洗滌劑，如Triton X 100或吐溫20。

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