產品 | 貨號 | 包裝（干粉） | 價格 |
CA-SiR Ligand | CA-SiR-1 | 50 nmol | 7500 |
CA-SiR-2 | 5 nmol | 1320 | |
CA-TMR Ligand | CA-TMR-1 | 150 nmol | 4500 |
CA-TMR-2 | 15 nmol | 1320 | |
CA-R110 Ligand | CA-R110-1 | 50 nmol | 7500 |
CA-R110-2 | 5 nmol | 1320 | |
CA assorted Ligands | CA-1 | CA-SiR-2 *1 | 3200 |
CA-TMR-2 *1 | |||
CA-R110-2*1 |
1、產品信息
產品 | 貨號 | 包裝（干粉） | λEx /λEm (nm) | 適用范圍 | 儲存條件 |
CA-SiR Ligand | CA-SiR-1 | 50 nmol | 651/668 | Confocal、SIM、STED | -20℃避光 |
CA-SiR-2 | 5 nmol | ||||
CA-TMR Ligand | CA-TMR-1 | 150 nmol | 555/578 | Confocal、SIM | |
CA-TMR-2 | 15 nmol | ||||
CA-R110 Ligand | CA-R110-1 | 50 nmol | 505/527 | ||
CA-R110-2 | 5 nmol | ||||
CA assorted Ligands | CA-1 | CA-SiR-2 *1 | -- | Confocal、SIM、STED | |
CA-TMR-2 *1 | |||||
CA-R110-2*1 |
2. 產品簡介
HaloTag 技術基于融合蛋白標簽和合成熒光配基之間共價鍵的形成，可用于標記細胞或其 他生化環境中的目的蛋白以表征和分析其定位及功能。HaloTag 報告基因蛋白是 33kDa 的單體 蛋白，是一種經基因工程改造、無催化活性的水解酶衍生物，在生理條件下可以快速和 HaloTag 熒光配體形成不可逆的共價鍵從而實現對目的蛋白的高特異性標記[1]。此技術已經廣泛應用于 哺乳動物細胞、植物、細菌、酵母和活體模式動物等生物體系。
CA-SiR Ligand 則是一款以四甲基硅羅丹明為母體的遠紅發射熒光配體，基于其在溶液中 無色親酯的內酯結構和標記在 HaloTag 蛋白后熒光的兩性離子結構之間的高效轉換，可以實現 對目標蛋白的“免洗”標記。
CA-TMR Ligand 和 CA-R110 Ligand 是以氧羅丹明為母體的熒光配體，二者皆具有良好 的熒光亮度、較高的光穩定性、較低的光毒性和較好的細胞膜滲透能力；目前已廣泛應用于寬 場、共聚焦、單分子定位示蹤和 SIM 超分辨成像等多種模態的成像系統中，其較好的生物相 容性使其可以應用于哺乳動物細胞、植物、細菌、酵母等生物體系的熒光成像。
相較于 CA-TMR Ligand 和 CA-R110 Ligand 熒光配體，CA-SiR Ligand 熒光配體不僅具有 良好的熒光亮度、較高的光穩定性和較低的光毒性，其jijia的生物相容性和高效的細胞膜滲透能力，使得 CA-SiR Ligand 熒光配體在哺乳動物細胞、植物、細菌、酵母和活體模式動物等生 物體系中有著廣泛的應用，并可在除寬場、共聚焦、單分子定位示蹤和 SIM 之外的 STED 超 分辨成像體系中進行活細胞熒光成像。
3.實驗步驟
3.1 在 CA-SiR Ligand 中加入 50 μL/5 μL 新鮮干燥的 DMSO，混合均勻，得到 1 mM 母液。
3.2 將培養基預熱至 37 ℃，將 CA-SiR Ligand 母液按照 1000- 5000 倍稀釋比例加入到預熱的 培養基中，稀釋后的染液建議盡快使用，久置后可能導致部分染料分解或沉淀。
3.3 吸去已經表達 Halo-tag 蛋白細胞的培養基，更換為稀釋好的培養基染液，在培養箱中孵育
5-15 分鐘后即可在不更換培養基的情況下進行“免洗”熒光成像。也可以對用預熱的培養基 清洗細胞一至兩次后用于熒光成像。
注：1、我們建議對大多數細胞系使用 200-250 nM，如 HeLa、COS7、U-2OS 等；對組織或活 體動物染色使用 500-1000 nM。
2、不同樣品染色條件有所差異，建議起始染色方法為 1000 倍稀釋，15 分鐘染色，請根 據實際染色效果進行調整。
3、CA-TMR Ligand 和 CA-R110 Ligand 細胞滲透性熒光配基的實驗步驟類同上述實驗操 作。
