（二）菌種的置入和培養：
1.檢查取樣室內門并關緊；
2.打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門；
3.取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打開氮氣閥2進氣，使指針回復零位，關掉閥2。第二次重復操作一次。第三次操作時，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打開閥4進混合氣，使指針回復零位，關掉閥
青島厭氧培養箱YQX-II手套厭氧箱技術參數：
型號 | YQX-II |
取樣室形成厭氧狀態時間 | <5分鐘 |
操作室形成厭氧時間 | <1小時 |
厭氧環境維持時間 | 操作室在停止補充微量混合氣體的情況下，≥12小時 |
培養室使用溫控范圍 | 室溫+3~50℃ |
培養室溫度波動 | ±0.5℃ |
培養室溫度均勻性 | 1℃ |
電源/功率 | 220V,50Hz/600W |
培養室尺寸(cm) | 75×21×22 |
操作室尺寸(cm) | 82×65×60 |
外形尺寸(cm) | 120×70×140 |
混合氣體配比 | 氮氣：85﹪ 氫氣：5﹪ 二氧化碳：10﹪ |
氮氣 | 99.9﹪的高純氮 |
青島厭氧培養箱YQX-II手套厭氧箱一、操作室厭氧環境形成：
按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內放入兩個五毒塑料袋。打開設備后配，電源開關后，按控制牌上的總電源鍵，使設備通電。先用橡皮管插入操作室內進氣口，另一個插入塑料袋，接通氮氣進氣路，打開厭氧培養箱操作室氮氣控制閥，使兩只塑料袋充足氮氣后，關閉電磁閥，然后扎緊袋口，把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊，把塑料袋內氮氣漸漸的放于操作室內，至全部防除。厭氧培養箱操作室內打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，并在厭氧指示條反應區上滴一點潔凈水，1-2小時后，觀察其變況，反應部分深藍色變為淺藍為操作室內達到厭氧環境。
二、菌種的置入和培養：
檢查厭氧培養箱取樣室內門有沒有關緊，打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門，取樣室充氮置換三次過程，然后打開取樣室氧氣閥進氣，使指針回復零位，關掉閥門。厭氧培養箱需要長期連續使用的條件，每天在操作室內放入指示條觀察，如不能正常就必須重新換氣，要長期連續輸入微量的混合氣體，使補進的氮氣能和微量的氮結合通過催化吸收，保證了室內厭氧狀態，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右，連續培養運行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。
一、操作室厭氧環境形成
1 按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內放入二個無毒塑料袋。
2 通電源開照明燈，開控溫儀，調節所需溫度及安全溫度。
3 操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。
4 關緊取樣室內外門，并抽真空校驗。
5 操作室內DI一次置換（氮氣置換）：
（1）先用橡皮管插入操作室內進氣口，另一頭插入塑料袋。
（2）接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥，使二只塑料袋充足氮氣，然后扎緊袋口。
（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
（4）把塑料袋內氮氣漸漸地放于操作室內，至全部放出。
6 操作室DI二次置換（氮氣置換）重復一 次充氮過程，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。
7 操作室DI三次置換（混合氣體置換）：
（混合氣體配比為：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）
（1）調換氣路打開混合氣道通閥門進氣，充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣。
（2）混合氣充滿塑料袋后，關掉混合氣直通閥（三通閥），使混合氣經過流量計輸入操作并調整流量計，流量為每分鐘10毫升左右。
（3）把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。
（4）通過三次換氣后，操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態。
8 操作室內打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一 小時后打開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變況，不變色為操作室內達到厭氧環境。
9 開紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理。滅菌時間自定。
