| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | N/A | 溶劑 | Water |
| 存儲條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑，轉(zhuǎn)染試劑是一種功能強(qiáng)大且用途廣泛的轉(zhuǎn)染試劑，可將核酸引入真核細(xì)胞，引入動物細(xì)胞。它可以有效地將各種有效載荷轉(zhuǎn)染到各種貼壁和懸浮細(xì)胞系中。它可用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染以及基于siRNA和shRNA的基因敲低實(shí)驗和基因表達(dá)研究。它對所有轉(zhuǎn)染細(xì)胞均提供的轉(zhuǎn)染效率。Transfectamine 5000的低毒性也使轉(zhuǎn)染細(xì)胞具有更高的生存能力。與大多數(shù)其他轉(zhuǎn)染試劑相比，Transfectamine 5000更易于使用，并且不需要特殊的介質(zhì)。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑。
樣品實(shí)驗方案
簡要概述
1.準(zhǔn)備細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染
2.準(zhǔn)備Transfectamine 5000-DNA混合物
3.將Transfectamine 5000-DNA混合物添加到細(xì)胞培養(yǎng)物中
4.過夜培養(yǎng)
5.用適當(dāng)?shù)姆椒ǚ治鲛D(zhuǎn)染效率
溶液制備
1.工作溶液配制
1.1將2.5ug DNA與200uL無血清培養(yǎng)基混合。
1.2在步驟1中添加7.5 uL Transfectamine 5000。
1.3充分混合并在室溫下孵育20分鐘。 注意：Transfectamine 5000和DNA的比例需要針對不同的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化，通常：轉(zhuǎn)染試劑（uL）與DNA（ug）的比例= 3-5 uL至1ug
6孔板與10cm板樣品方案
| 組成 | 6孔板（每孔） | 10厘米板 |
| 新鮮培養(yǎng)基 | 2ml | 6ml |
| 質(zhì)粒 | ~2.5ug | 7.5-10ug |
| 無血清培養(yǎng)基 | 200ul | 600ul |
樣品示例及操作
1.細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備
1.1轉(zhuǎn)染時將細(xì)胞培養(yǎng)至約90％融合。
1.2轉(zhuǎn)染前用新鮮的生長培養(yǎng)基替換。 例如，對于6孔板，每孔用2 mL培養(yǎng)基替換，對于10 cm板，用6 mL培養(yǎng)基替換。
2.轉(zhuǎn)染方案
將Transfectamine 5000 -DNA混合物添加至培養(yǎng)板并培養(yǎng)過夜。 注意：重組蛋白早可在轉(zhuǎn)染后16小時開始檢測。轉(zhuǎn)染后72?96小時可觀察到大表達(dá)水平。
