溶酶體是含有酸性水解酶的細(xì)胞器，它通過(guò)自噬來(lái)分解廢物和細(xì)胞碎片。 AAT Bioquest提供CytoFix 溶酶體紅色探針，可選擇性地對(duì)溶酶體染色。 即使固定后，該探針也可以很好地保留在溶酶體中。 該探針會(huì)滲透完整的活細(xì)胞，并保留在溶酶體內(nèi)。 這種染料在溶酶體中產(chǎn)生的熒光至少可以保留1周，使其成為很好的溶酶體示蹤染料。 該探針的主要特征是其高染色效率，固定后可長(zhǎng)時(shí)間保留并減少了人工操作時(shí)間。該探針可與GFP表達(dá)的細(xì)胞或其他細(xì)胞器染色劑一起使用，進(jìn)行多色分析。 它既可用于懸浮細(xì)胞，也可用于貼壁細(xì)胞，并易于適應(yīng)各種熒光平臺(tái)。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的CytoFix 溶酶體紅色探針。
適用儀器
| 熒光顯微鏡 | |
| 激發(fā)： | Cy3/TRITC濾波片 |
| 發(fā)射： | Cy3/TRITC濾波片 |
| 推薦孔板： | 黑色透明 |
| 濾波片： | Cy3/TRITC濾波片組 |
樣品實(shí)驗(yàn)方案
簡(jiǎn)要概述
在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中準(zhǔn)備細(xì)胞
除去生長(zhǎng)培養(yǎng)基
將細(xì)胞與CytoFix LysoRed工作溶液在37°C下孵育20-30分鐘
去除CytoFix LysoRed工作溶液
使用Cy3 / TRITC濾光片組在熒光顯微鏡下分析
溶液配制
工作溶液配制
CytoFix LysoRed工作溶液：將20 µL儲(chǔ)備溶液添加到10 mLHanks緩沖液和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或自備緩沖液中，并充分混合。
注意：20 µL儲(chǔ)備液足以進(jìn)行一次96孔板分析。 可以根據(jù)特定的細(xì)胞類(lèi)型和細(xì)胞或組織對(duì)探針的滲透性來(lái)改變?nèi)旧珬l件。
注意 未使用的CytoFix LysoRed儲(chǔ)備溶液可以分裝，并在≤-20°C下以較小的等分試樣存儲(chǔ)。 避光并避免重復(fù)的凍融循環(huán)。
實(shí)驗(yàn)步驟
1.在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中準(zhǔn)備細(xì)胞。
2.去除細(xì)胞培養(yǎng)基并洗滌兩次（可選）
3.在細(xì)胞培養(yǎng)板中加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的CytoFix LysoRed工作溶液
（注意細(xì)胞膜探針的佳濃度因具體應(yīng)用而異。）
4.避光保存，在37°C下孵育細(xì)胞20-30分鐘。
5.除去每個(gè)孔中的工作溶液。 用HHBS或您自備緩沖液洗滌細(xì)胞一次（可選）。
6.可選：在室溫下用4％甲醛將細(xì)胞固定20分鐘。 洗滌細(xì)胞兩次以除去任何固定液。
7.使用帶有Cy3 / TRITC濾光片組的熒光顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞中的熒光信號(hào)。
