溶酶體是含有酸性水解酶的細胞器，它通過自噬來分解廢物和細胞碎片。 AAT Bioquest提供CytoFix 溶酶體紅色探針，可選擇性地對溶酶體染色。 即使固定后，該探針也可以很好地保留在溶酶體中。 該探針會滲透完整的活細胞，并保留在溶酶體內。 這種染料在溶酶體中產生的熒光至少可以保留1周，使其成為很好的溶酶體示蹤染料。 該探針的主要特征是其高染色效率，固定后可長時間保留并減少了人工操作時間。該探針可與GFP表達的細胞或其他細胞器染色劑一起使用，進行多色分析。 它既可用于懸浮細胞，也可用于貼壁細胞，并易于適應各種熒光平臺。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優質的CytoFix 溶酶體紅色探針。
適用儀器
| 熒光顯微鏡 | |
| 激發： | Cy3/TRITC濾波片 |
| 發射： | Cy3/TRITC濾波片 |
| 推薦孔板： | 黑色透明 |
| 濾波片： | Cy3/TRITC濾波片組 |
樣品實驗方案
簡要概述
在生長培養基中準備細胞
除去生長培養基
將細胞與CytoFix LysoRed工作溶液在37°C下孵育20-30分鐘
去除CytoFix LysoRed工作溶液
使用Cy3 / TRITC濾光片組在熒光顯微鏡下分析
溶液配制
工作溶液配制
CytoFix LysoRed工作溶液：將20 µL儲備溶液添加到10 mLHanks緩沖液和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或自備緩沖液中，并充分混合。
注意：20 µL儲備液足以進行一次96孔板分析。 可以根據特定的細胞類型和細胞或組織對探針的滲透性來改變染色條件。
注意 未使用的CytoFix LysoRed儲備溶液可以分裝，并在≤-20°C下以較小的等分試樣存儲。 避光并避免重復的凍融循環。
實驗步驟
1.在生長培養基中準備細胞。
2.去除細胞培養基并洗滌兩次（可選）
3.在細胞培養板中加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的CytoFix LysoRed工作溶液
（注意細胞膜探針的佳濃度因具體應用而異。）
4.避光保存，在37°C下孵育細胞20-30分鐘。
5.除去每個孔中的工作溶液。 用HHBS或您自備緩沖液洗滌細胞一次（可選）。
6.可選：在室溫下用4％甲醛將細胞固定20分鐘。 洗滌細胞兩次以除去任何固定液。
7.使用帶有Cy3 / TRITC濾光片組的熒光顯微鏡觀察細胞中的熒光信號。
