有絲分裂是細(xì)胞生長的決定性階段。 Cell Navigator CDy6有絲分裂成像試劑盒有絲分裂成像試劑盒是通過觀察溶酶體動(dòng)力學(xué)來檢測有絲分裂的使用工具。CDy6有絲分裂成像試劑盒使用可滲透細(xì)胞的溶酶體染料CDy6，該染料在酸性環(huán)境中表現(xiàn)出高靈敏度，并在溶酶體中表現(xiàn)出明亮的信號。在有絲分裂期間，溶酶體迅速向核堆積，信號強(qiáng)度的急劇增加，可以實(shí)時(shí)查看。百螢生物為您提供優(yōu)質(zhì)的Cell Navigator CDy6有絲分裂成像試劑盒。
適用儀器
| 熒光顯微鏡 | |
| Ex: | Cy3/TRITC濾波片組 |
| Em： | Cy3/TRITC 濾波片組 |
| 推薦孔板: | 黑色透明底板 |
樣品實(shí)驗(yàn)方案
簡要概述
在96孔板中制備細(xì)胞（100 µL /孔）
添加10X CDy6工作溶液（10 µL /孔）
添加待測化合物
在37°C下孵育
使用Cy3 / TRITC濾波片組的熒光顯微鏡成像
溶液配制
1.儲備溶液配制
CDy6儲備溶液配制
將15 µL DMSO加入小瓶CDy6（組分A）中，制成1000X CDy6儲備液，注意避光。
諾考達(dá)唑溶液配制
將50 µL DMSO加入含諾考達(dá)唑的小瓶（組分B）中，制成1000X 諾考達(dá)唑儲備液。
2.工作溶液配制
CDy6工作溶液配制
在您選擇的100 µL培養(yǎng)基或緩沖液中加入1 µL 1000X CDy6溶液，并充分混合。
注意，100 µL的10X CDy6工作溶液足以以96孔板的形式進(jìn)行10次測試。在實(shí)驗(yàn)之前準(zhǔn)備足夠的10X CDy6工作溶液，并立即使用。
可選：諾考達(dá)唑工作溶液（10X）
通過將1 µL 諾考達(dá)唑與100 µL培養(yǎng)基混合，制備10X 諾考達(dá)唑工作溶液以進(jìn)行陽性對照。
樣品示例及操作
1.在透明底孔板中，添加1000到40,000個(gè)細(xì)胞/孔（對于96孔板為90 µL，對于384孔板為22.5 µL）。
2.向每個(gè)孔中添加10 µL /孔（96孔板）或2.5 µL /孔（384孔板）的10X CDy6工作溶液。
3.將待測化合物添加到細(xì)胞中，并在5％CO2培養(yǎng)箱中于37°C孵育（例如24、48或96小時(shí)）。
4.（可選）對于陽性對照，向每個(gè)孔中添加11X /孔（96孔板）或3 µL /孔（384孔板）的10X 諾考達(dá)唑工作溶液，并在37°C的5％CO2培養(yǎng)箱中孵育16小時(shí)℃。治療后有絲分裂細(xì)胞群將呈現(xiàn)富集狀態(tài)。
注意，應(yīng)對每個(gè)細(xì)胞系進(jìn)行單獨(dú)評估，以確定細(xì)胞密度。
5.使用Cy3 / TRITC濾光片組的熒光顯微鏡成像。
