Thermo Scientific™ Pierce™ IgG 篩選用蛋白 G 瓊脂糖離心板為快速純化和篩選抗體以及免疫沉淀 (IP) 提供了高通量形式。96孔離心板的每個孔可以處理 10–100 µL 的血清、細胞培養上清液或腹水樣品。
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖的特點:
?蛋白 G—固定化蛋白 G 適用于從小鼠、人、牛、山羊和綿羊血清中純化多克隆 IgG(包括人 IgG3 和小鼠 IgG1 同種型)
? 瓊脂糖樹脂—支持物為交聯 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B),這是蛋白親和純化方法的較常用樹脂
? 惰性且穩定—*的生產方法通過不帶電荷的抗浸出性共價鍵固定蛋白 G,因此非特異性結合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 標準容量— Pierce 蛋白 G 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 G,提供 11–15 mg 人 IgG/mL 樹脂的結合容量
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖包含共價固定至高質量交聯 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的重組蛋白 G。該特殊種類的親和樹脂可提供通用的色譜特點組合,用于從哺乳動物血清樣品中獲得高得率的全 IgG 和對全 IgG 進行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學特性適用于許多親和純化系統。
蛋白 G 是源自 G 群鏈球菌的細菌細胞壁蛋白,現可在大腸桿菌中以重組形式生產。與蛋白A相同,蛋白G可與大多數哺乳動物的免疫球蛋白結合,結合部位主要為其Fc區。天然蛋白G包含兩個免疫球蛋白結合位點以及白蛋白和細胞表面結合位點。重組形式的蛋白G中已除去這些白蛋白及細胞表面結合位點,以減少免疫球蛋白純化過程中的非特異性結合。重組蛋白G分子量約為21.6kDa,但在SDS-PAGE中表觀大小為31至34kDa。IgG 結合功能在 pH 值為 5 時較佳,但在近中性條件(pH 值 7.0 至 7.2)下也可高效結合。
與蛋白 A 相比,蛋白 G 可與人、小鼠和大鼠血清中更廣泛的 IgG 亞類結合。其中,除了與蛋白A一樣能夠結合其他類型免疫球蛋白之外,蛋白G還對人IgG3、小鼠IgG1和大鼠的全部三種IgG亞型具有特別強的結合能力。因此,在涉及這些物種和抗體亞型的應用中一般建議采用蛋白G。關于其他物種,蛋白 G 對牛、山羊和綿羊 IgG 的結合能力更強,但對豬、豚鼠、犬和貓 IgG 的結合能力弱于蛋白 A。
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯化學法制備,該方法與傳統配體固定方法相比具有多項優勢。AminoLink 固定后,瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化學基團,從而避免了可能導致的非特異性結合,并且形成基本不可逆的穩定結合。所得的高結合能力樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 G。
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖可從許多哺乳動物物種的血清和其他液體中有效地親和純化 IgG。除了來自人、山羊和綿羊樣品的大多數 IgG 同種型外,蛋白 G 還特別適用于與小鼠抗體(包括 IgG1)配合使用。
交聯 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性:
?支持 pH 值穩定性:2 至 14(短期);3 至 13(長期)
? 平均粒徑:45 至 165 微米
? 排阻極限:10,000至4,000,000 道爾頓
?體積流速:約1 mL/分鐘(對于1 cm 直徑柱)
?線性速度:30 cm/h
? 壓力:低于 25psi (1.5 bar);定義為樹脂可承受的跨色譜柱壓降(注:液相色譜裝置的指示表壓可能測量的是總系統壓力,而不是跨色譜柱壓降。)
更多產品數據
? 使用抗體結合蛋白進行抗體純化
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖的特點:
?蛋白 G—固定化蛋白 G 適用于從小鼠、人、牛、山羊和綿羊血清中純化多克隆 IgG(包括人 IgG3 和小鼠 IgG1 同種型)
? 瓊脂糖樹脂—支持物為交聯 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B),這是蛋白親和純化方法的較常用樹脂
? 惰性且穩定—*的生產方法通過不帶電荷的抗浸出性共價鍵固定蛋白 G,因此非特異性結合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 標準容量— Pierce 蛋白 G 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 G,提供 11–15 mg 人 IgG/mL 樹脂的結合容量
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖包含共價固定至高質量交聯 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的重組蛋白 G。該特殊種類的親和樹脂可提供通用的色譜特點組合,用于從哺乳動物血清樣品中獲得高得率的全 IgG 和對全 IgG 進行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學特性適用于許多親和純化系統。
蛋白 G 是源自 G 群鏈球菌的細菌細胞壁蛋白,現可在大腸桿菌中以重組形式生產。與蛋白A相同,蛋白G可與大多數哺乳動物的免疫球蛋白結合,結合部位主要為其Fc區。天然蛋白G包含兩個免疫球蛋白結合位點以及白蛋白和細胞表面結合位點。重組形式的蛋白G中已除去這些白蛋白及細胞表面結合位點,以減少免疫球蛋白純化過程中的非特異性結合。重組蛋白G分子量約為21.6kDa,但在SDS-PAGE中表觀大小為31至34kDa。IgG 結合功能在 pH 值為 5 時較佳,但在近中性條件(pH 值 7.0 至 7.2)下也可高效結合。
與蛋白 A 相比,蛋白 G 可與人、小鼠和大鼠血清中更廣泛的 IgG 亞類結合。其中,除了與蛋白A一樣能夠結合其他類型免疫球蛋白之外,蛋白G還對人IgG3、小鼠IgG1和大鼠的全部三種IgG亞型具有特別強的結合能力。因此,在涉及這些物種和抗體亞型的應用中一般建議采用蛋白G。關于其他物種,蛋白 G 對牛、山羊和綿羊 IgG 的結合能力更強,但對豬、豚鼠、犬和貓 IgG 的結合能力弱于蛋白 A。
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯化學法制備,該方法與傳統配體固定方法相比具有多項優勢。AminoLink 固定后,瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化學基團,從而避免了可能導致的非特異性結合,并且形成基本不可逆的穩定結合。所得的高結合能力樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 G。
Pierce 蛋白 G 瓊脂糖可從許多哺乳動物物種的血清和其他液體中有效地親和純化 IgG。除了來自人、山羊和綿羊樣品的大多數 IgG 同種型外,蛋白 G 還特別適用于與小鼠抗體(包括 IgG1)配合使用。
交聯 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性:
?支持 pH 值穩定性:2 至 14(短期);3 至 13(長期)
? 平均粒徑:45 至 165 微米
? 排阻極限:10,000至4,000,000 道爾頓
?體積流速:約1 mL/分鐘(對于1 cm 直徑柱)
?線性速度:30 cm/h
? 壓力:低于 25psi (1.5 bar);定義為樹脂可承受的跨色譜柱壓降(注:液相色譜裝置的指示表壓可能測量的是總系統壓力,而不是跨色譜柱壓降。)
更多產品數據
? 使用抗體結合蛋白進行抗體純化
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.