用于培養細胞的 Thermo Scientific 亞細胞蛋白分離試劑盒可從 5 個不同的細胞區室中分離和富集蛋白。

用于培養細胞的亞細胞蛋白分離試劑盒的特點：

?簡明 — 在不到 3 小時內從哺乳動物培養細胞中提取功能性細胞質、膜、可溶性核、染色質結合和細胞骨架蛋白組分
? 便利 — 無需使用梯度超速離心即可執行簡單程序
? 全套 — 使用單一試劑盒獲得細胞質、膜、可溶性核、染色質結合和細胞骨架蛋白組分
? 培養細胞 — 經開發和優化，配合培養的哺乳動物細胞使用；對于組織樣品，使用用于組織的亞細胞分離試劑盒
? 兼容 — 將提取物用于下游應用，如蛋白檢測、Western 印跡、蛋白檢測、電泳遷移率變動實驗、報告基因和酶活性檢測。

亞細胞組分的應用：
? 從不同細胞區室中提取和富集蛋白
? 從相同細胞中分離細胞質、核、膜和細胞骨架蛋白
? 分析細胞質、核、膜和細胞骨架中的蛋白
? 研究蛋白轉位

亞細胞蛋白分離使得可從特定細胞區室進行蛋白定位評估和蛋白富集。Thermo Scientific 亞細胞蛋白分離試劑盒含有各種試劑，可按步驟在不到 3 小時內將細胞裂解為功能性細胞質、膜、可溶性核、染色質結合和細胞骨架蛋白組分。從每個亞細胞區室獲得的提取物通常在各組分間有低于 15% 的污染，該純度對于大多數研究蛋白定位和再分布的實驗而言已足夠。

用于培養細胞的亞細胞蛋白分離試劑盒含有 4 種提取緩沖液、一種穩定的核酸酶和 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制劑混合物。每個試劑盒有足以分離 50 個 20 µL 細胞團塊（相當于約 2 g 的細胞團）的試劑。（對于組織樣品，使用我們的用于組織的亞細胞蛋白分離試劑盒。）

添加至細胞團塊中的種試劑盒試劑會導致選擇性膜透化，釋放可溶性細胞質內容物。第二種試劑可溶解血漿、線粒體和 ER-高爾基體膜，但不能溶解核膜。在通過離心回收完整的細胞核后，第三種試劑產出可溶的細胞核抽提物。使用微球菌核酸酶進行一次額外的細胞核抽提，以釋放染色質連結細胞核蛋白。然后使用種試劑提取回收的不溶性團塊以分離細胞骨架蛋白。

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