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廣電計量檢測集團股份有限公司

DNA測序服務 檢測服務

參考價 15
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協議為準
  • 公司名稱上海閃晶分子生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質生產廠家
  • 更新時間2023/5/23 12:41:21
  • 訪問次數259
產品標簽:

DNA測序服務測序

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上海閃晶生物科技有限公司2004年成立于上海,是一家長期致力生物醫藥研發外包服務的公司,現階段業務內容主要有引物探針合成基因合成多肽合成蛋白表達純化服務、熒光定量PCR服務、抗體制備服務 、SNP分析慢病毒包裝等相關服務,同時提供部分診斷試劑原料和試劑。公司坐落于上海市紫竹科技園附近,毗鄰上海交大、華東師范大學及國際跨國公司;學術氛圍濃郁,具有得天獨厚的人文環境。閃晶公司始終以“專業公司,打造專業服務'為理念,努力為客戶提供服務。


抗體,技術服務,生化試劑,實驗室耗材
DNA測序技術主要依據 Sanger 的雙脫氧鏈終止法。以DNA單鏈為模板,在特定條件下,用特異的引物在測序級DNA聚合酶的作用下,根據堿基互補配對原則,不斷將 4 種脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3'- 羥基末端并使引物鏈得到延伸。
DNA測序服務 檢測服務 產品信息

DNA測序原理

DNA測序技術主要依據 Sanger 的雙脫氧鏈終止法。以DNA單鏈為模板,在特定條件下,用特異的引物在測序級DNA聚合酶的作用下,根據堿基互補配對原則,不斷將 4 種脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3'- 羥基末端并使引物鏈得到延伸。這種鏈的延伸是通過引物的 3'- 羥基和脫氧核糖核苷酸底物的 5'- 磷酸基團形成磷酸二酯鍵來完成的。如果這種反應體系中加入雙脫氧核糖核苷酸 (ddNTP) ,這種 2'3'ddNTP 的 5'- 磷酸基團是正常的 (4 種不同的熒光標記 ) ,而 3' 位置缺少羥基,因此在 DNA 聚合酶作用下,仍然可以通過 5'- 磷酸基團與引物鏈的 3'- 羥基反應摻入到引物鏈中,但是由于 ddNTP 沒有 3'- 羥基,不能繼續與下一個 5'- 磷酸基團形成磷酸二酯鍵而導致引物鏈延伸的終止。這樣,在測序反應體系中, DNA 引物鏈不斷合成與偶然終止,產生一系列的長短不等的核苷酸鏈,然后將這些反應產物進行電泳,即可得測序圖譜。

樣品要求

樣品類型

相應要求

 

 

菌體

1. 說明載體抗性類型,我們提供 Amp, Kan, Tet 及 Chl 四種抗生素。
2.   提供 1ml 左右過夜培養的菌液,加 15% 滅菌甘油,于 Eppendorf 管中封口保存,防止交叉污染或滲漏。
3.   大量樣品測序,建議在一次性塑料培養皿固體培養基上穿刺培養。
4.   建議盡量提供穿刺培養的菌種。

 

質粒

1. 質粒溶于適量體積雙蒸水中(不含 TE ),電泳檢測總量大于 2mg 。

2. 建議用相關試劑盒純化。
3. 如有可能,同時提供 1ml 含有相應質粒的菌液備用。
4. 大質粒必需注明載體長度。

 

未純化 PCR 產物

1. 片段大于 150bp 。
2. 提供 50ul ~ 100ul PCR 擴增產物 ( 總量 500ng-1ug) 。
3. 取 3ul 樣品,電泳檢測應為明亮的一條帶,無雜帶。

 

純化 PCR 產物

1.PCR 產物溶于雙蒸水中(不含 TE )。

2. 濃度大于 20ng/ul ,體積大于 20ul ,長片段需適當增加量。
3. 電泳檢測條帶專一。

自備的引物

1. 濃度不低于 5pmole/ul( 或 5umol/L) ,體積大于 20ul 。
2. 隨機引物和簡并引物不能用于測序。
3. 盡可能提供引物全序列、 PCR 退火溫度,以供參考。


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