WB實驗代測
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western blotting),它是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。
Western blotting服務實驗流程
u 細胞及組織蛋白質抽提;
u 蛋白質定量;
u 變性聚丙烯酰胺不連續凝膠電泳(SDS-PAGE);
u 蛋白質轉膜;
u 膜的封閉;
u 一抗、二抗孵育;
u 結果檢測:化學發光法檢測,X 膠片曝光顯影;
u 數據分析;
代測說明:
1、有趨勢,不需做預實驗。
2、沒有趨勢,要求做預實驗。
3、WB檢測里包含了蛋白提取。
4、實驗結束,返還膠圖。
5、一個指標只能跑一張膜
WB實驗代測的優勢:
1、western免疫印跡是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。