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Mouse IL-4 ELISA Kit (High Sensitivity) 生化試劑

參考價 2600
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協議為準
  • 公司名稱南京沃博生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號AB-LH204B
  • 所  在  地南京市
  • 廠商性質生產廠家
  • 更新時間2022/12/20 9:15:00
  • 訪問次數348
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自主生化試劑品牌warbio已經入駐多家高校平臺,先后入駐南京大學,南京農業大學,東南大學,西湖大學,華南理工大學,北京師范大學,福建農林大學,北京庫巴扎,天津基理,上海至采信息采購平臺等公司秉持誠信經營,為科研工作者提供更好的產品。專業代理銷售國內外生命科學領域的產品以及warbio沃博生物常規生化試劑,公司長期以來與眾多國內外廠家和多家專業代理銷售公司保持密切聯系、溝通與合作,擁有穩定、有效的產品供應渠道。公司長期以來以提供高質量的產品、實惠的價格和優質的服務贏得客戶的好評,與多家高等院校、研究所、醫院、制藥企業等大型科研機構建立長期穩定的合作關系。
主要代理北京莊盟生物分子試劑,Abmart艾比瑪特抗體,美國Phytoteche一級代理,美國AATBIO細胞染料,安普未來恒溫擴增試劑盒,英國TwistDx公司RPA等溫擴增試劑盒,美國GLPBIO抑制劑,Tolobio吐露港生物  ,藥物發現一站式平臺 陶術生物Topscience等國外生命科學產品試劑耗材。



生物科生物科技技術開發、技術服務、技術轉讓、技術咨詢;實驗室設備、化工原料及產品、機電設備、藥品、化妝品、包裝材料、實驗室耗材技技術開發、技術服務、技術轉讓、技術咨詢;實驗室設備、化工原料及產品、機電設備、藥品、化妝品、包裝材料、實驗室耗材
CAS AB-LH204B 產品規格 48T
級別 超純、高純
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗Mouse IL-4 抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和化的檢測抗體,經過孵育,樣本中存在的Mouse IL-4 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中Mouse I
Mouse IL-4 ELISA Kit (High Sensitivity) 生化試劑 產品信息

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗Mouse IL-4 抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和化的檢測抗體,經過孵育,樣本中存在的Mouse IL-4 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中Mouse IL-4 的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗Mouse IL-4 抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和化的檢測抗體,經過孵育,樣本中存在的Mouse IL-4 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中Mouse IL-4 的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測技術。特異性抗Mouse IL-4 抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和化的檢測抗體,經過孵育,樣本中存在的Mouse IL-4 與固相抗體和檢測抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中Mouse IL-4 的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定吸光度值。

樣本采集與貯存收起

1. 細胞培養上清

300 × g 離心 10 分鐘去除沉淀物,即刻檢測,或者分裝,-20℃以下貯存。

2. 血清樣本

離心管收集血清。血樣凝集 30 分鐘后,1,000 × g 離心 10 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測,或者分裝,-20℃以下貯存。

3. 血漿樣本

EDTA、或肝素抗凝收集血漿樣本。1,000 × g 離心 30 分鐘收集樣本。即刻檢測,或者分裝,-20℃以下貯存。本試劑盒可能適用于其它生物學樣本。細胞培養上清、血清和血漿已經過驗證。

試劑盒提供的材料收起

g5.png

自備材料收起

1) 能夠檢測 450 nm 吸光度的酶標儀,參考波長 570 nm 或 630 nm

2) 移液器及槍頭、加樣槽

3) 準備試劑用的試管、離心管、量筒等

4) 蒸餾水或去離子水

5) 渦旋振蕩器、微孔板振蕩器



試劑準備收起

檢測前請將所有的試劑、樣本恢復至室溫(18℃-28℃)。如果濃縮的試劑出現結晶,37℃溫浴,直至結晶全部溶解。

1×洗液

吸取 20×濃縮洗液 50 ml 至 1 L 的量筒,加蒸餾水至 1,000 ml,輕輕混勻,避免泡沫。轉移至干凈瓶內。2 - 25℃貯存,1×洗液可穩定保存 30 天。

1×檢測緩沖液

吸取 10×濃縮檢測緩沖液 5 ml 至 100 ml 量筒,加蒸餾水至 50 ml,輕輕混勻,避免泡沫。2 - 8℃貯存,1×檢測緩沖液可穩定保存 30 天。

試劑盒保存于 2 - 8℃,有效期標注于標簽上。

技術要點收起

1) 重溶或者混合蛋白的時候,始終避免氣泡產生。

2) 避免交叉污染,在進行標準品加樣、樣本加樣,以及不同試劑加樣的時候,請更換槍頭。不同的試劑,使用不同的加樣槽。

3) 在應用自動洗板機時,加入洗液之后,設置 30 秒的浸泡程序,或者在不同的洗滌步驟將微孔板掉轉 180 度,這樣可以提高分析的準確度。

4) 為保證結果的精確性,孵育時封好封板膜。

5) 顯色底物在添加之前應是無色的。保持顯色底物始終處于避光態。

6) 終止液的添加順序應與顯色底物的添加順序相同。

添加終止液之后,底物的顏色應由藍色轉變為黃色。如果底物呈現綠色,說明終止液與顯色底物沒有充分混勻。

7) 推薦所有的檢測樣本和標準品在檢測中設復孔。

8) 在任何情況下,避免接觸微孔板的內表面。

操作步驟收起

檢測之前請將所有的試劑、樣本平衡至室溫。
1) 準備好所有需要的試劑及工作濃度標準品。
2) 將不需要的板條拆卸下來,放回裝有干燥劑的鋁箔袋,重新封好封口。
3) 浸泡酶標板:加入 300μl 1×洗液靜置浸泡 30 秒。為了獲得理想的實驗結果浸泡是必須的。棄掉洗液之后,在吸水紙上將微孔板拍干。洗板完成之后,請立即使用微孔板,不要讓微孔板干燥。
4) 加標準品:標準品孔加入 100μl 2倍倍比稀釋的標準品。空白孔加入 100μl 1×檢測緩沖液(血清/血漿樣本)或培養基
(細胞培養上清樣本)。
5) 加樣本:血清/血漿:樣本孔加入 80μl 1×檢測緩沖液和 20μl 樣本。細胞培養上清:樣本孔加入 100μl 細胞培養上
清。保證步驟 4、5 連續加樣,不要間斷。加樣過程在 15 分鐘內完成。
6) 孵育:使用封板膜封板。300 轉/分鐘振蕩,室溫孵育 1.5 小時。
7) 洗滌:棄掉液體,每孔加入 300μl 洗液洗板,洗滌 6 次。每次洗板,在吸水紙上拍干。為獲得理想的實驗性能,必
須移除殘留液體。
8) 加檢測抗體:每孔加入 100μl 稀釋的檢測抗體(1:100 稀釋)。使用封板膜封板。300 轉/分鐘振蕩,室溫孵育 30 分鐘。
9) 洗滌:重復步驟 7。
10) 加酶孵育:每孔加入 100μl 稀釋的辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(1:100 稀釋)。使用新的封板膜封板。300 轉/分
鐘振蕩,室溫孵育 30 分鐘。
11) 洗滌:重復步驟 7。
12) 加信號增強劑孵育:每孔加入 100μl 稀釋的信號增強劑(1:100 稀釋)。使用新的封板膜封板。300 轉/分鐘振蕩,室溫
精確孵育 15 分鐘。
13) 洗滌:重復步驟 7。
14) 再次加酶孵育:每孔加入 100μl 稀釋的辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(1:100 稀釋)。使用新的封板膜封板。300
轉/分鐘振蕩,室溫精確孵育 15 分鐘。
15) 洗滌:重復步驟 7。
16) 加底物顯色:每孔加入 100μl 顯色底物 TMB,避光,室溫孵育 5 - 30 分鐘。
17) 加終止液:每孔加入 100μl 終止液。顏色由藍色變為黃色。如果顏色呈現綠色或者顏色的變化明顯不均勻,請輕輕
叩擊板框,充分混勻。
18) 檢測讀數:在 30 分鐘之內,使用酶標儀進行雙波長檢測,測定 450 nm 最大吸收波長和 570 nm 或 630 nm 參考波長
下的 OD 值。校準后的 OD 值為 450 nm 的測定值減去 570 nm 或 630 nm 的測定值。僅使用 450 nm 測定會導致 OD
值偏高,并且準確度降低。

結果計算收起

90.png

試劑盒性能收起

1) 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.99;

2) 靈敏度:檢測濃度小于50pg/mL;

3) 特異性:不與其他可溶性結構類似物交叉反應;

4) 重復性:板內變異系數小于10%、板間變異系數小于15%;

5) 貯藏:2-8°C,遊光防潮保存;

6) 有效期:6個月。


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