Countess II FL細(xì)胞計(jì)數(shù)儀特點(diǎn)：
1. 處理時(shí)間：約10秒即可精確完成細(xì)胞計(jì)數(shù)及細(xì)胞內(nèi)至多2種熒光的定量測定，并提供細(xì)胞總數(shù)、活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞活率、細(xì)胞直徑、直徑分布圖、熒光分布圖和細(xì)胞圖片等數(shù)據(jù)
2. 對焦方式：自動對焦和手動對焦2種方式供實(shí)驗(yàn)者選擇
3. 具有門控功能：可調(diào)節(jié)細(xì)胞的亮度、直徑、圓度和熒光閾值等參數(shù)，對感興趣的細(xì)胞群進(jìn)行計(jì)數(shù)或熒光定量
4. 細(xì)胞樣品范圍：1 x 104-1 x 107個(gè)細(xì)胞/ml
5. 細(xì)胞樣品的大小：5-60 µm
6. 樣品量：10 µl，節(jié)約寶貴的細(xì)胞樣品
7. 光學(xué)系統(tǒng)：3通道(明場+2個(gè)EVOS® LED光立方插槽)，有多種熒光光源可供選擇，可根據(jù)應(yīng)用需求同時(shí)選配至多2種熒光光源
8. 可兼容一次性玻片和可重復(fù)使用的玻片
9. 程序：已經(jīng)預(yù)設(shè)好計(jì)數(shù)程序并已校準(zhǔn)，每次軟件升級后需進(jìn)行一次校準(zhǔn)。
10. Countess自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀配有攝像頭(2.5X光學(xué)放大和500萬像素)
對應(yīng)于Countess II FL細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上常用的染料的熒光光立方
| 光立方 | 激發(fā)光譜(nm) | 發(fā)射光譜(nm) | 常用的相容染料/熒光蛋白 |
|---|---|---|---|
| DAPI | 357/44 | 447/60 | DAPI, Hoechst, BFP |
| TagBFP | 390/18 | 447/60 | TagBFP |
| CFP | 445/45 | 510/42 | ECFP, Lucifer Yellow |
| GFP | 470/22 | 510/42 | GFP, Alexa Fluor® 488, SYBR® Green, FITC |
| YFP | 500/24 | 524/27 | EYFP, acridine orange (+DNA) |
| RFP | 531/40 | 593/40 | RFP, Alexa Fluor® 546, Fluor® 555, Cy®3, DsRed, Rhodamine Red, dTomato |
| Texas Red® | 585/29 | 624/40 | Texas Red®, Alexa Fluor® 568, Alexa Fluor® 594, MitoTracker® Red, mCherry |
| Cy®5 | 628/40 | 692/40 | Alexa Fluor® 647, Alexa Fluor® 660, DRAQ5® |
| Cy®5.5 | 655/46 | 794/16 | Cy®5.5 |
可重復(fù)使用或一次性玻片
一次性玻片和槍頭的安裝成本使得很多實(shí)驗(yàn)室打消了了停用繁瑣的手動細(xì)胞計(jì)數(shù)的念頭。為此，Countess II FL全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用了可選配可重復(fù)使用的玻璃玻片的設(shè)計(jì)，從而顯著降低了自動細(xì)胞計(jì)數(shù)的長期耗材成本。而針對那些希望享受到一次性玻片便利的研究人員， Countess II FL細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
也支持使用針對原版Countess®細(xì)胞計(jì)數(shù)儀開發(fā)的同款PMMA塑料玻片。
細(xì)胞成塊
采用Countess® II FL全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀時(shí)這也不是問題。無論您采用自動還是手動細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，在對含有成塊細(xì)胞的樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，都難以獲得精確的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。而Countess® II FL全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的*計(jì)數(shù)算法可以清晰地細(xì)胞塊內(nèi)的細(xì)胞邊界，因而即使是成團(tuán)塊樣品也可進(jìn)行精確、精密的細(xì)胞計(jì)數(shù)。
自動細(xì)胞計(jì)數(shù) – 即便面對成塊樣品時(shí)。在含有0.4%臺盼蘭染色劑溶液的懸液中將NIH/3T3細(xì)胞按照1:1的比例混合，然后取10 μL的樣品加入到腔室玻片上并將玻片插入到Countess® II FL全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀中。Countess® II FL全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的分割和計(jì)數(shù)算法可以對細(xì)胞塊進(jìn)行解析，并根據(jù)臺盼藍(lán)排除法進(jìn)行活/死細(xì)胞評分。在本實(shí)驗(yàn)之中的樣品之中，共計(jì)數(shù)出了3.09 x 106的活細(xì)胞（不含臺盼藍(lán)染色劑）和5.86 x 103的死細(xì)胞（積聚了臺盼藍(lán)染色劑）。
