快速幫您解決PCR過(guò)程中令人頭痛的DNA污染問(wèn)題
                                                                                                                     特別適用于PCR室分子生物學(xué)試驗(yàn)的常規(guī)清潔
        DNA擴(kuò)增技術(shù)是目前實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)之一。但是由于在PCR過(guò)程中出現(xiàn)的DNA污染卻是令人很頭痛的事情，目前主要有2種方法來(lái)預(yù)防DNA的污染：
1、通過(guò)加入DNA酶或者化學(xué)方法修飾降解DNA；
2、通過(guò)對(duì)DNA堿基進(jìn)行修飾，保證DNA完整性以阻止DNA聚合酶的序列讀取；然而經(jīng)DNA雙鏈斷裂分析結(jié)果顯示，目前市場(chǎng)上的大多數(shù)DNA清除試劑均不能*的降解DNA！針對(duì)上述產(chǎn)品的不足，德國(guó)AppliChem公司推出了全新的DNA污染/核酸污染清除試劑DNA-ExitusPlus。該試劑在市面已有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上做了進(jìn)一步的改良，能同時(shí)對(duì)DNA鏈進(jìn)行雙鏈斷裂和降解。

        DNA-ExitusPlus是一種非堿性，沒(méi)有腐蝕性，沒(méi)有致癌影響的DNA污染去除溶液。它可以使用在實(shí)驗(yàn)室的所有地方。據(jù)的一項(xiàng)測(cè)試表明，傳統(tǒng)商業(yè)化的DNA去除劑往往含有有潛在腐蝕性危險(xiǎn)的化學(xué)成分，包含疊氮化合物、礦物質(zhì)酸如磷酸、鹽酸、刺激性強(qiáng)的過(guò)氧化物，堿性物質(zhì)如氫氧化鈉等。德國(guó)AppliChem公司的DNA-ExitusPlus則表現(xiàn)，沒(méi)有對(duì)金屬板產(chǎn)生任何損傷。對(duì)實(shí)驗(yàn)室其他類(lèi)型的儀器表面也進(jìn)行了腐蝕性檢測(cè)，DNA-ExitusPlus不會(huì)對(duì)塑料、橡膠等儀器的表面產(chǎn)生任何損傷。

1、DNA-ExitusPlus   DNA污染清除劑特點(diǎn)：
A、可去除實(shí)驗(yàn)室儀器及操作場(chǎng)所表面DNA和RNA的污染；
B、可清潔實(shí)驗(yàn)室內(nèi)PCR工作場(chǎng)所和儀器裝置，防止假性擴(kuò)增；
C、可用于清潔電泳設(shè)備、移液器、離心管、離心柱等裝置；
D、簡(jiǎn)單，試劑以可反復(fù)使用的噴霧裝置存放并噴灑使用；
E、快捷，只需10分鐘，噴灑后擦拭后即可；
F、高效，采用接觸催化及協(xié)同作用非酶性降解DNA和RNA；
G、安全，所有的組分均可降解，不會(huì)殘留在表面對(duì)人體和機(jī)器造成傷害；
H、無(wú)毒，不含有腐蝕性的酸堿物質(zhì)。

2、DNA-ExitusPlus  DNA污染清除劑使用方法：
清理實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面：直接噴灑，反應(yīng)10-15分鐘后，用無(wú)菌水濕紙擦拭后風(fēng)干即可，無(wú)需用無(wú)菌水沖洗；
清理實(shí)驗(yàn)室器材：浸濕紙巾后擦拭儀器設(shè)備表面，再用干凈的紙巾擦干；對(duì)于小型器材設(shè)備，直接浸潤(rùn)后擦干；
清理塑料玻璃設(shè)備：通過(guò)渦旋將試劑覆蓋到完整設(shè)備表面，無(wú)菌水沖洗后風(fēng)干；
清理移液器：按說(shuō)明拆卸移液器后將軸浸潤(rùn)到試劑1分鐘，無(wú)菌水沖洗后風(fēng)干。
值得注意的DNA污染清除試新的配方成功減少了指示劑和低濃度的酒精。在試劑的組分中減少酒精的含量，可以很好的改善其活力。

3、DNA-ExitusPlus  DNA污染清除劑使用效果驗(yàn)證：
       該試劑在已有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上做了進(jìn)一步的改良，DNA-ExitusPlus能同時(shí)對(duì)DNA鏈進(jìn)行雙鏈斷裂和降解。其DNA清除效果非常明顯，當(dāng)合適的應(yīng)用于工作區(qū)域時(shí)，能*的消除由于非目標(biāo)DNA導(dǎo)致的擴(kuò)增。圖一C為未處理對(duì)照，X1-X4為傳統(tǒng)商業(yè)化DNA清除試劑，D、D+與D+（10min）為DNA-ExitusPlus系列DNA清除試劑。

                                                                          
圖二為傳統(tǒng)DNA去污劑與DNA-ExitusPlus的潛在腐蝕能力的實(shí)驗(yàn)對(duì)照。我們選擇金屬盤(pán)做實(shí)驗(yàn)，因?yàn)樗菍?shí)驗(yàn)材料和儀器的常用材料。將試劑分為10ul等份分別放在不同的金屬盤(pán)表面。以無(wú)菌水（0）為對(duì)照，經(jīng)過(guò)20分鐘孵育，將金屬盤(pán)擦拭干凈并用無(wú)菌水清洗，經(jīng)*的清洗后拍照。X2,X3 和 D為傳統(tǒng)DAN去污劑在不同金屬盤(pán)表面引起的腐蝕與損傷，而用經(jīng)DNA- ExitusPlus(D+)處理的金屬盤(pán)的表面沒(méi)有任何損傷。DNA-ExitusPlus可以在抗腐蝕試驗(yàn)中顯現(xiàn)出它的特性，在所有的金屬表面的后期處理中沒(méi)有損害，沒(méi)有腐蝕。在其他塑料制品上做實(shí)驗(yàn)，依舊沒(méi)有任何腐蝕。這種試劑可穩(wěn)定儲(chǔ)存12個(gè)月并且是耐熱的。
                                                           
用DNA-ExitusPlus去除DNA污染的在PCR試驗(yàn)中，將重量為0.1 到1ng的測(cè)試DNA的凍干粉放在PCR試管中，在放有凍干DNA樣本中分別加入無(wú)菌水和DNAExitusPlus，此后再用100ul的無(wú)菌水將PCR管清洗兩次（見(jiàn)圖三）。在PCR反應(yīng)中，將50ul的混合液加入以上管子，反應(yīng)的混合物包含的引物，可使對(duì)照DNA和測(cè)試DNA擴(kuò)增。對(duì)照DNA（1ng）加入到樣本中證明PCR反應(yīng)沒(méi)有被抑制住。擴(kuò)增得到的DNA帶與所測(cè)試DNA是相符的，表明了DNA分子的模板依舊是完整的。在*降解和去除測(cè)試DNA以后，PCR反應(yīng)沒(méi)有擴(kuò)增這條模板任何的片段。陰性對(duì)照為加入無(wú)菌水的測(cè)試DNA模板和對(duì)照模板，跑膠后觀察發(fā)現(xiàn)，在經(jīng)過(guò)DNA-ExitusPlus處理以后的PCR反應(yīng)，只是擴(kuò)增出了對(duì)照DNA的片段。這表明，DNA- ExitusPlus可清除所有測(cè)試DNA模板的痕跡。