小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒檢測(cè)原理
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
反應(yīng)類(lèi)型 | 夾心法 |
規(guī)格 | 96T/48T |
中文名稱(chēng) | 小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 |
反應(yīng)時(shí)間 | 1.5 h |
檢測(cè)方法 | 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 |
檢測(cè)范圍 | |
靈敏度 | |
上樣體積 | 50 μL/孔 |
樣本類(lèi)型 | 血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本 |
▎ 重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
▎ 批內(nèi)差
取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
▎ 批間差
選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值
精密度
精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
穩(wěn)定性
經(jīng)測(cè)定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。
為了幫助您更好地解決在實(shí)驗(yàn)中可能碰到的各種問(wèn)題,我們?cè)O(shè)計(jì)了這些問(wèn)題指導(dǎo),配以試劑盒內(nèi)的說(shuō)明書(shū)一起供您參考使用。很多因素都將導(dǎo)致免疫測(cè)定實(shí)驗(yàn)的失敗,而大多數(shù)技術(shù)失誤是可以通過(guò)全面閱讀和準(zhǔn)確理解說(shuō)明書(shū)以及實(shí)驗(yàn)步驟來(lái)避免的。若對(duì)試劑盒內(nèi)的說(shuō)明書(shū)有任何意見(jiàn)和建議,歡迎反饋。我們期待聽(tīng)到您的聲音,從而完善我們的產(chǎn)品,更好地為您服務(wù)。
◆ 仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)
◆ 檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過(guò)有效期,請(qǐng)勿使用。
◆ 按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
◆ 標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。
短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存
◆ 準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品, (比如移液器,試管,清洗器, 酶標(biāo)儀)
◆ 按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
◆ 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件,保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)推薦的條件存儲(chǔ)。
◆ 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液(比如沉淀或變色)。有些試劑,比如標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液或者檢測(cè)稀釋液,可能在設(shè)計(jì)時(shí)就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標(biāo)板之前,必需充分混勻。而由于沉淀物的特性,在加入酶標(biāo)板之前,必需不停攪拌。
◆ 保證充分的孵育時(shí)間和溫度。
◆ 切勿使用不同生產(chǎn)批號(hào)的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。
◆ 在混合或溶解蛋白溶液時(shí),避免泡沫產(chǎn)生。
◆ 在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之前,安排好實(shí)驗(yàn)流程。
◆ 在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之前,清潔工作臺(tái)。
◆ 若有問(wèn)題,應(yīng)與我公司或代理商進(jìn)行溝通。