標準血紅蛋白參考液：在溶血液中,血紅蛋白(硫化血紅蛋白除外)中亞鐵離子(Fe2+)被高鐵氰-化鉀氧化成高鐵離子(Fe3+),血紅蛋白轉化成高鐵血紅蛋白。高鐵血紅蛋白同氰-化鉀中的氰離子反應生成氰化高鐵血紅蛋白。氰化高鐵血紅蛋白在波長540mm左右有一個較寬的吸收峰,它在540nm處的吸光度同它在溶液中的濃度成正比。標本中血紅蛋白的濃度可通過先測得吸光度,然后從標準曲線上按吸光度讀取。
[操作方法]
1.光電比色計標準曲線繪制法:
1.1標準液每套四支,其濃度分別為50gHb/L、100gHb/L、150gHb/L、200gHb/L
血液。
1.2用50倍稀釋后的文齊氏液或蒸餾水作空白管，在540nm波長處用分光光度計或綠色濾光片的光電比色計進行測量，調吸光度（A值）為“0”，再測量標準液管，每管測量3次吸光度（A值），取均值。縱坐標為吸光度（A值），橫坐標為Hb克數（g Hb/L血液），在標準計算紙上繪制標準曲線。
1.3用標定過的吸管準確吸取20μl血液，放入盛有5ml文齊氏液的試管中吸洗三次混勻（251倍稀釋），5分鐘后在同一比色計上測定血樣品管的吸光度值（A值），從標準曲線查出A值相對應血樣品的血紅蛋白克數（g Hb/L）。
2. 血紅蛋白計的校正法:
2.1 用50倍稀釋后的文齊氏液或蒸餾水作空白管，將血紅蛋白計的讀數調為“0”值。
2.2 取出空白管，換上單濃度血紅蛋白標準管（100gHb/L、130gHb/L、
150gHb/L），旋轉按鈕使血紅蛋白計的讀數與標準管克數一致。按1.3項方法制備血樣品管并混勻，5分鐘后在同一血紅蛋白計上測定，顯示克數為該血樣品的實際克數（g Hb/L）。
標準血紅蛋白參考液
