產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：LEFTY2左右不對(duì)稱發(fā)育因子2酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱：LEFTY2 ELISA Kit

規(guī)格：48T/96

貨號(hào)：CS-1921E

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

試劑準(zhǔn)備：

1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

注意事項(xiàng)：

1.試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。

2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過(guò)50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。

5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無(wú)微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。

7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。

8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。

TFPI 人組織因子途徑抑制物酶聯(lián)免疫試劑盒     TFPI ELISA Kit

MICA 人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A酶聯(lián)免疫試劑盒     MICA ELISA Kit

TPS 人組織多肽特異性抗原酶聯(lián)免疫試劑盒     TPS ELISA Kit

TPA 人組織多肽抗原酶聯(lián)免疫試劑盒     TPA ELISA Kit

HD 人組織蛋白去乙酰化酶酶聯(lián)免疫試劑盒     HD ELISA Kit

CTSS 人組織蛋白酶S酶聯(lián)免疫試劑盒     CTSS ELISA Kit

CTSL1/CTSL 人組織蛋白酶L1酶聯(lián)免疫試劑盒     CTSL1/CTSL ELISA Kit

cath-K 人組織蛋白酶K酶聯(lián)免疫試劑盒     cath-K ELISA Kit

CTSH 人組織蛋白酶H酶聯(lián)免疫試劑盒     CTSH ELISA Kit

Cath G Ab 人組織蛋白酶G自身抗體酶聯(lián)免疫試劑盒     Cath G Ab ELISA Kit

cath-G 人組織蛋白酶G酶聯(lián)免疫試劑盒     cath-G ELISA Kit

cath-D 人組織蛋白酶D酶聯(lián)免疫試劑盒     cath-D ELISA Kit

CTSC 人組織蛋白酶C酶聯(lián)免疫試劑盒     CTSC ELISA Kit

CTSB 人組織蛋白酶B酶聯(lián)免疫試劑盒     CTSB ELISA Kit

HAT 人組蛋白乙酰化酶酶聯(lián)免疫試劑盒     HAT ELISA Kit

HDAC2 人組蛋白脫乙酰化酶2酶聯(lián)免疫試劑盒     HDAC2 ELISA Kit

A    1.25μg/支*5    添加于100ml HB0121中

1%亞碲酸鉀溶液    5ml*10    適量添加于HB0121

4-甲基傘形酮-D-葡萄糖醛酸苷    （MUG）    0.1    0.01g添加于100ml LST-MUG中用于0157鑒定

mEC 肉湯          mE.Coli Broth    250    用于0157選擇性增菌(USDA-FSIS方法)

mTSB肉湯    mTSB Broth With Novobiocin    250    用于0157選擇性增菌(ISO方法)

新生霉素A    Novobiocin    2mg/支*5    添加于100ml mEC肉湯和mTSB肉湯中用于0157選擇性增菌

SD-39瓊脂    SD-39 Agar    250    用于濾膜法大腸桿菌0157的分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)

平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA）    Plate Count Agar    250    國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂,含糖,用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定(SN標(biāo)準(zhǔn))

煌綠乳糖膽鹽肉湯 （BGLB）        Brilliant Green Lactose Bile Broth    250    用于大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定(SN標(biāo)準(zhǔn))

EC 肉湯          E.Coli Broth    250    用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定(SN標(biāo)準(zhǔn))

伊紅美藍(lán)瓊脂 (EMB)    Eosin-Methylene Blue Agar    250    弱選擇性培養(yǎng)基、用于分離腸道致病菌，特別是大腸桿菌(SN標(biāo)準(zhǔn))

營(yíng)養(yǎng)肉湯 (NB)       Nutrient Broth    250    一般細(xì)菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯、增菌等(GB標(biāo)準(zhǔn))

營(yíng)養(yǎng)瓊脂 (NA)       Nutrient Agar    250    細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(GB標(biāo)準(zhǔn))

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基         Lactose Bile Broth    250    用于大腸菌群，糞大腸菌群，大腸桿菌的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))

乳糖復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基        Lactose Broth    250    用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))

LEFTY2左右不對(duì)稱發(fā)育因子2酶聯(lián)免疫試劑盒去氧膽酸鹽瓊脂         Desoxycholate Lactose Agar    250    用于大腸桿菌固體平板測(cè)定,腸道菌選擇性分離

MR-VP培養(yǎng)基         Methyl Red Voges Proskauer Broth    250    用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))

結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂 (VRBA)        Violet Red Bile Agar    250    用于大腸菌群的固體平板檢測(cè)(SN標(biāo)準(zhǔn))

西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂         Simmons Citrate Agar    250    用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

腸道菌計(jì)數(shù)瓊脂 (VRBDA)         Violet Red Bile Dextrose Agar      250    用于腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別(MERCK方法)

菌種保存培養(yǎng)基       Strain Store Medium    250    用于常用細(xì)菌斜面?zhèn)鞔笆覝乇４?/p>

操作步驟：

1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

模板2：

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