028381 卵黃多粘菌素瓊脂平板(MYP)
(Mannitol Yolk Polymyxin Agar plate)
用 途:
卵黃多粘菌素瓊脂平板用于蠟樣芽孢桿菌的菌數測定及分離培養(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.14-2003,SN0176-92和SN/T2206.2-2009,ISO標準)。
原 理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;D—為可發酵糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;酚紅為pH指示劑;卵黃含有,蠟樣芽孢桿菌產生酶,在菌落周圍產生沉淀環;并發酵D—產酸使菌落顯黃色;可抑制雜菌的生長。
培養基配方(每升):
蛋白胨 10g
牛肉膏粉 1g
D— 10g
氯化鈉 10g
瓊脂 15g
酚紅 0.025g
最終pH7.4±0.2
使用方法: (平板計數法)
1、樣品的制備。
以無菌操作將檢樣25g(mL)用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液做成10-1—10-5的稀釋液。
2、取各稀釋液0.1mL接種到MYP瓊脂平板上,用滅菌L形玻璃棒均勻涂布于整個瓊脂表面。每稀釋度接種兩個MYP瓊脂平板。
3、將平板置于36±1℃培養12-20h。
4、選取適當菌落的平板進行計數。并計算同一稀釋度兩個平板的平均菌落數。
蠟樣芽孢桿菌在MYP平板上生成的菌落為粉紅色,環繞產生酶沉淀環。如反應不典型,可繼續培養24h再計數。
5、計數后從每個平板上選取5個已計數的菌落,按有關操作進行證實實驗。
6、根據證實實驗確定為蠟樣芽孢桿菌的菌落數,按比例計算出該皿內的蠟樣芽孢桿菌菌落數,然后乘其稀釋倍數,即得每克(或mL)樣品所含蠟樣芽孢桿菌數。例如MYP平板的可疑菌落為25個,取5個鑒定,證實為4個,乘上稀釋倍數(如10-4),再乘上1 g(或mL)檢樣數(取的是0.1mL樣)則為:
25×4/5×10-4×10=2×106
質量控制:
質控菌株接種后于36±1℃培養24h,結果如下。
貯 存:貯存于4-8℃。貯存期三個月。
規 格:20個/盒
參考文獻:
1. GB/T 4789.14-2003 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物學檢驗 蠟樣芽孢桿菌
2. GB/T 4789.28-2003 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物學檢驗 染色法,培養基和試劑
3. SN 0176-92 中華人民共和國進出口商品檢驗行業標準 出口食品中蠟樣芽孢桿菌檢驗方法
4. SN/T2206.2-2009 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準 化妝品微生物檢驗方法 第2部分:需氧芽孢桿菌和蠟樣芽孢桿菌
5. ISO7932:2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus-----Colony-count technique at 30℃