二硫鍵修飾

　　二硫鍵是很多蛋白質立體結構中*的組成部分。我們幾乎可以在所有的胞外肽類和蛋白質分子中發現這些共價鍵。當一個半GAS的硫原子與位于蛋白質不同位置的另一半GAS的硫原子形成共價單鍵時，一個二硫鍵就形成了。這些鍵有助于穩定蛋白質，特別是那些從細胞中分泌的蛋白質。

　　一個二硫鍵的有效形成涉及多方面，包括對半GAS的恰當管理、對該氨基酸殘基的保護、保護基團的脫除方法和配對方法等。

　　合生生物具有成熟的二硫鍵成環技術，如果多肽中只含有1對Cys，那二硫鍵的形成是簡單的。多肽經固相或液相合成，然后在pH8-9的溶液中進行氧化。

　　當需要形成2對或2對以上的二硫鍵時，合成過程則相對復雜。盡管二硫鍵的形成通常是在合成方案的后面階段完成，但有時引入預先形成的二硫化物是有利于連合或延長肽鏈的。合生生物使用很廣泛的Cys的保護基團有Bzl、Meb、Mob、tBu、Trt、Tmob、TMTr、Acm、Npys等。我們擅長二硫鍵多肽合成包含：

　　1.分子內兩對二硫鍵形成，分子間兩對二硫鍵形成

　　2.分子內三對二硫鍵形成，分子間三對二硫鍵形成

　　3.類胰島素多肽合成，不同肽序間兩對二硫鍵形成

　　4.三對二硫鍵多肽合成

　　經典案例

　　Sequence:DC*TSHNGAC*NHHSHC*C*SNVC*NTWAHLC*T

　　Disulfide:Cys2-Cys16；Cys9-Cys20；Cys15-Cys27

　　為什么半胱氨基（Cys)如此特殊?

　　※Cys的側鏈有一個非常活躍的反應性巰基。此基團中的的氫原子可很容易地被自由基和其他基團取代，因而易與其他分子形成共價鍵。

　　※二硫鍵是許多蛋白質三維結構中的重要組成部分。二硫橋鍵可降低肽的彈性、增加剛度，并減少潛在構象的數量。這樣的構象限制對生物活性和結構穩定性來說是至關重要的。它的替換對蛋白質的整體結構來說將可能是戲劇性的。

　　※疏水性氨基酸如Leu、Ile、Val是螺旋的穩定劑。因為即使半GAS沒有形成二硫鍵也可以使α螺旋穩定。即如果所有的半GAS殘基處于還原態（-SH，攜帶自由巰基），高百分比的螺旋片段將有可能。

　　※半GAS形成的二硫鍵對三級結構的穩定來說是持久的。在大多數情況下，鍵間的S-S橋對形成四級結構是必須的。有時形成二硫鍵的半GAS殘基在一*級結構中相距甚遠。

　　※二硫鍵的拓撲是分析蛋白質一*級結構同源性的基礎。位于同源蛋白的半GAS殘基是非常保守的。僅SAS在統計學上比半GAS更為保守。

　　※半GAS位于巰基酶催化部位的中心。半GAS可直接與底物形成酰基中間體。還原形態作為“巰基緩沖器”維持著蛋白中的半GAS處于還原態。在低的pH值時，平衡偏向還原態，-SH形式，而在堿性環境下，-SH更傾向于被氧化，形成-SR，而R是除氫原子外的任何物質。

　　※半GAS也可作為解毒性與過氧化氫和有機過氧化物反應。

二硫鍵修飾。合肥合生生物 是致力于從事生命科學研究和提供高質量的生物技術外包服務公司（CRO），主營多肽及小分子等化合物定制合成，同時還擁有自己開發的細胞株、菌株等產品，并承接相關的技術服務以及其他品牌產品。

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