Cell Navigator 細(xì)胞膜染色試劑盒 橙色熒光是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于染色細(xì)胞膜的試劑盒，該細(xì)胞膜染色試劑盒可快速，均勻標(biāo)記質(zhì)膜，而沒(méi)有凝集素表現(xiàn)出的細(xì)胞類型差異。它可以用作HCS（高含量篩選）的分割工具，以及對(duì)細(xì)胞質(zhì)膜進(jìn)行染色以用于標(biāo)準(zhǔn)熒光顯微鏡檢查。試劑盒中使用的染色劑可以固定，但不能通透，因此不適用于還涉及通過(guò)抗體探測(cè)內(nèi)部靶標(biāo)的實(shí)驗(yàn)。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Cell Navigator 細(xì)胞膜染色試劑盒 橙色熒光。
適用儀器
| 熒光顯微鏡 | |
| Ex: | TRITC 濾波片組 |
| Em： | TRITC 濾波片組 |
| 推薦孔板: | 黑色透明底板 |
樣品實(shí)驗(yàn)方案
簡(jiǎn)要概述
1.在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中準(zhǔn)備細(xì)胞
2.將細(xì)胞與Cellpaint Orange工作溶液在37oC下孵育10-20分鐘
3.在熒光顯微鏡下于Ex / Em = 540/590 nm（TRITC濾光片組）分析細(xì)胞
溶液配制
1.儲(chǔ)備溶液配制
所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 Cellpaint 橙色儲(chǔ)備溶液（500X）：
將100 µL DMSO（組分C）添加到Cellpaint Orange（組分A）小瓶中，制成500X Cellpaint Orange儲(chǔ)備液。 注意：如果管密封嚴(yán)密，未使用的500X Cellpaint Orange儲(chǔ)備液可以在≤-20oC下保存一個(gè)月。 避光。
2.工作溶液配制
將20 µL 500X Cellpaint Orange儲(chǔ)備溶液添加到10 mL的測(cè)定緩沖液（組分B）中，并充分混合以制成Cellpaint Orange工作溶液。 這種Cellpaint Orange工作溶液在室溫下至少可穩(wěn)定8小時(shí)。 避光。 注意：20 µL 500X Cellpaint Orange 500X儲(chǔ)備溶液足以用于一個(gè)96孔板。
樣品示例及操作
2.避光保存，在37°C下孵育細(xì)胞10-20分鐘。 注意：細(xì)胞膜探針的濃度取決于具體應(yīng)用。 可以根據(jù)特定的細(xì)胞類型和細(xì)胞或組織對(duì)探針的滲透性來(lái)改變?nèi)旧珬l件。
3.除去每個(gè)孔中的Cellpaint Orange工作溶液。
4.用生理緩沖液（例如HHBS，PBS或您選擇的緩沖液）洗滌細(xì)胞3次。
5.染色后固定細(xì)胞（可選）。 用4％甲醛固定細(xì)胞15-30分鐘。 用生理緩沖液洗滌細(xì)胞三遍。
6.使用帶有TRITC濾光片組（Ex / Em = 540/590 nm）的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞中的熒光信號(hào)。
圖1.在96孔黑色透明底板中，用Cell Navigator 細(xì)胞膜染色試劑盒*橙色熒光*染色的HL-60細(xì)胞的熒光圖像。 使用配備有TRITC濾波片的熒光顯微鏡使細(xì)胞成像。
