Amplite 熒光法堿性磷s酶檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于磷酸酶的試劑he，堿性磷酸酶是廣泛分布于人體各臟器器官中，其中以肝臟為多其次為腎臟，骨骼、腸、和胎盤等組織,。這種酶能催化核酸分子脫掉5’磷酸基團，從而使DNA 或RN段的5’-P末端轉換成5’-OH末端，并生成一分子的有機基團和一分子的無機磷酸。堿性磷酸酶不是單一的酶，而是一組同功酶。堿性磷酸酶在ELISA、免疫組化，Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的靈敏度。它廣泛地用于多種生物學分析（特別是免疫分析）和基于ELISA的疾病診斷。Amplite 熒光法堿性磷酸酶分析試劑盒 *紅色熒光* 利用磷酸酶SunRed紅色熒光底物的特性，來定量檢測溶液中、細胞抽提液，固相物質表面（例如PVDF膜）的堿性磷酸酶活性。這種磷酸酶熒光底物在磷酸酶催化下產生的熒光產物具有強烈的紅色熒光。本試劑盒提供所有必需組分，包括我們的產品組合和分析方法，并且與可用于HTS（高通量篩選）。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的Amplite 熒光法堿性磷s酶檢測試劑盒。
樣品實驗方案
簡要概述
1.準備堿性磷酸酶工作溶液（50μL）
2.添加堿性磷酸酶標準品和/或測試樣品（50μL）
3.在室溫或37°C孵育30至120分鐘
4.監測Ex / Em = 620/660 nm處的熒光強度（截止= 630 nm）
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環。
1.1 SunRed 底物儲備液（250X）：
將100μL雙無菌H2O加入到SunRed 底物（組分A）的小瓶中，制備250X SunRed 底物儲備溶液。 應立即使用原液。
1.2堿性磷酸酶標準溶液（100 U / mL）：
添加100μL含0.1％BSA（H2O-0.1％BSA）的蒸餾水至堿性磷酸酶標準品（組分C，10單位），以產生100單位/ mL堿性磷酸酶標準溶液。 注意：堿性磷酸酶標準溶液不穩定。
2.標準溶液
堿性磷酸酶標準
將10μL100單位/ mL堿性磷酸酶標準溶液加入990μLH2O-0.1％BSA中，生成1,000 mU / mL堿性磷酸酶標準溶液。 取1,000 mU / mL堿性磷酸酶標準溶液，進行1：3連續稀釋，得到連續稀釋的堿性磷酸酶標準品（AS7-AS1）和H2O-0.1％BSA。
3.工作溶液
對于一個96孔板，將20μL250XSunRed 底物儲備溶液加入到5 mL分析緩沖液（組分B）中并充分混合以制備堿性磷酸酶工作溶液。 注意：避免光照并為每個實驗準備新鮮的反應混合物。
