Amplite 熒光法堿性磷s酶檢測試劑盒 是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于磷酸酶的試劑he，堿性磷酸酶是廣泛分布于人體各臟器器官中，其中以肝臟為多其次為腎臟，骨骼、腸、和胎盤等組織,。這種酶能催化核酸分子脫掉5’磷酸基團(tuán)，從而使DNA 或RNA片段的5’-P末端轉(zhuǎn)換成5’-OH末端，并生成一分子的有機(jī)基團(tuán)和一分子的無機(jī)磷酸。堿性磷酸酶不是單一的酶，而是一組同功酶。堿性磷酸酶在ELISA、免疫組化，Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的靈敏度。它廣泛地用于多種生物學(xué)分析（特別是免疫分析）和基于ELISA的疾病診斷。用FDP，一種靈敏的堿性磷酸酶綠色熒光底物來定量檢測溶液中、細(xì)胞抽提液，固相物質(zhì)表面（例如PVDF膜）的堿性磷酸酶活性。本試劑盒提供所有必需組分，包括我們佳的產(chǎn)品組合和分析方法，并且與可用于HTS（高通量篩選）。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 熒光法堿性磷s酶檢測試劑盒.
樣品實(shí)驗(yàn)方案
簡要概述
1.準(zhǔn)備堿性磷酸酶工作溶液（50μL）
2.添加堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品（50μL）
3.在室溫或37°C孵育10 - 30分鐘
4.監(jiān)測Ex / Em = 490/525 nm處的熒光強(qiáng)度（Cutfoff = 515 nm）
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 FDP（250X）：
將100μLDMSO（組分D）加入到FDP小瓶（組分A）中以制備250X FDF儲備溶液。 應(yīng)立即使用FDP儲備溶液。
1.2 堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 U / mL）：
將100μL含0.1％BSA（H2O-0.1％BSA）的蒸餾水加入堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)品（組分C，10單位）中，得到100單位/ mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液。 注意：堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液不穩(wěn)定。
2.標(biāo)準(zhǔn)溶液
堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)
將10μL100單位/ mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液加入990μLH2O-0.1％BSA中，生成1,000 mU / mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液。 取1,000 mU / mL堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行1:10（AS7），然后在H2O-0.1％BSA中進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋，得到堿性磷酸酶標(biāo)準(zhǔn)品（AS6-AS1）的連續(xù)稀釋液。
3.工作溶液
將20μL250XFDP儲備溶液加入5 mL分析緩沖液（組分B）中并充分混合以制備堿性磷酸酶工作溶液。 注意：避光。
