Amplite 比色法堿性磷s酶檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于過氧化物酶的試劑盒，堿性磷酸酶是用于ELISA，免疫組織化學，Northern，Southern和Western印跡應用的高度靈敏的酶。 它廣泛用于各種生物測定（特別是免疫測定）和基于ELISA的診斷。 這種Amplite 堿性磷酸酶檢測試劑盒使用pNPP（一種生色磷酸酶底物）來定量溶液，細胞提取物以及固體表面（如PVDF膜）上的堿性磷酸酶活性。 該試劑盒通過我們優化的“混合和讀取”測定方案提供所有必需組分，該方案與HTS液體處理儀器兼容。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優質的Amplite 比色法堿性磷s酶檢測試劑盒。
樣品實驗方案
簡要概述
1.準備堿性磷酸酶標準品和/或測試樣品（50μL）
2.添加ALP工作溶液（50μL）
3.在室溫或37°C孵育10 - 30分鐘
4.監測400nm處的吸光度增加
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環。
1.1 pNPP儲備液（100X）：
將300μL蒸餾水加入pNPP小瓶（組分A）中。 好好混合。 應立即使用pNPP儲備溶液。 注意：如果妥善保存，解決方案應該有效期為3-4周。
1.2 堿性磷酸鹽標準溶液：
添加100μL含0.1％BSA（H2O-0.1％BSA）的蒸餾水至堿性磷酸酶標準品（組分C，10單位），以產生100單位/ mL堿性磷酸酶標準溶液。
2.標準溶液
堿性磷酸鹽標準
將10μL100單位/ mL堿性磷酸酶標準溶液加入990μLH2O-0.1％BSA中，生成1,000 mU / mL堿性磷酸酶標準溶液。 然后取100μL的1,000 mU / mL堿性磷酸酶標準溶液進行1:10稀釋，得到100 mU / mL堿性磷酸酶標準溶液（AS7）。 然后進行1：3連續稀釋以獲得剩余標準品（AS6-AS1）。 注意：應丟棄未使用的稀釋堿性磷酸酶標準溶液部分。
3.工作溶液
將50μLpNPP儲備溶液（100X）加入5mL測定緩沖液（組分B）中，使總體積為5.05mL的pNPP工作溶液。
