細胞STR鑒定檢測服務
細胞STR鑒定檢測服務
送樣要求：
1. 基因組DNA: OD 260/280 在1.8～2.0之間, 濃度≥50ng/μl,體積≥20μl；
2. 組織塊：介于綠豆粒~黃豆粒大小之間即可，
3. 新鮮細胞：（1）細胞數≥106；（2）貼壁細胞經胰蛋白酶消化后，離心收集細胞沉淀；（3）懸浮細胞直接離心收集細胞沉淀；（4）PBS清洗細胞沉淀，盡可能去除培養(yǎng)基與胰酶；
4. 凍存細胞：細胞數≥106，凍存細胞從液氮罐中，37℃水浴復蘇，融化后離心收集細胞沉淀，盡可能去除凍存液，否則會影響DNA抽提質量；
5. 樣本寄送：應在送樣包裹中放置冰袋或干冰，建議順豐快遞；
6. 為了保證DNA抽提質量，確保細胞在消化或凍存前，細胞狀態(tài)良好，處于生長對數期；
不建議以細胞懸液或細胞培養(yǎng)瓶形式寄送樣本
細胞STR鑒定樣本收集步驟參考
收集懸浮細胞沉淀步驟：
1.將細胞懸液轉移至離心管中
2. 200X g，離心10min，收集細胞
3. 移除上清液，用PBS清洗細胞沉淀1-2次
4. 最后200X g，離心10min，收集細胞沉淀
收集貼壁細胞沉淀步驟：
1.移除細胞培養(yǎng)基。
2.沿著培養(yǎng)皿壁緩慢加入PBS（無鈣鎂離子），勿將細胞沖離培養(yǎng)皿，溫和晃動培養(yǎng)皿，清洗細胞表面。
3.移除PBS。
4.加入細胞消化液（如胰蛋白酶等），使消化液能覆蓋所有細胞。在37℃孵育2-3min，溫和晃動培養(yǎng)皿知道細胞開始剝離培養(yǎng)皿。
5.加入培養(yǎng)基終止消化，溫和重懸細胞
6.200X g，離心10min，收集細胞
7.移除上清液，用PBS清洗細胞沉淀1-2次
8.最后200X g，離心10min，收集細胞沉淀
支原體檢測樣本制備：建議送檢上清
1.貼壁細胞上清液或細胞沉淀制備
貼壁細胞上清液制備：在無抗生素及其它抑菌或滅菌物質條件下培養(yǎng) 3 天，匯合度達到90% 左右時，直接吸取 1.0ml 細胞培養(yǎng)上清液移至 1.5ml 離心管中。
貼壁細胞沉淀制備：上述（a）貼壁細胞收取完上清后，加入1ml PBS，使用細胞刮刮取細胞，吸取轉移至1.5ml離心管，12000rpm離心沉淀細胞。（如果使用胰酶消化細胞，需要10ml PBS洗三遍后，1ml PBS重懸沉淀，然后轉移至1.5ml離心管，12000rpm離心獲得細胞沉淀。）
2.懸浮細胞上清液或細胞沉淀制備
懸浮細胞上清液制備：在無抗生素及其它抑菌或滅菌物質條件下培養(yǎng) 3 天，500g離心5min，直接吸取 1.0ml 細胞培養(yǎng)上清液移至 2ml 離心管中。
懸浮細胞沉淀制備：上述（c）吸取上清液后的沉淀，加入1ml PBS重懸沉淀，然后轉移至1.5ml離心管，12000rpm離心10min，棄上清，獲得細胞沉淀。
