StabilizorT1生物樣品穩(wěn)定儀的詳細介紹
在蛋白質(zhì)組研究中，要得到準確可靠的結(jié)果，很大程度上取決于樣品的前處理方法。保持樣品的穩(wěn)定性，即樣品是否反映目標蛋白質(zhì)在活體內(nèi)的原始狀態(tài)則尤為重要。一旦樣品從機體分離，調(diào)控平衡被打破，對于某些蛋白質(zhì)或多肽，離體降解是一個很快速的過程。降解導(dǎo)致蛋白質(zhì)的種類、含量和修飾快速變化，使得檢測到的部分蛋白質(zhì)或肽段實際上是高豐度蛋白質(zhì)的降解產(chǎn)生的片段，而不是樣品的原始蛋白質(zhì)（如下圖）。
在細胞和組織表達的蛋白質(zhì)組中，發(fā)揮重要生理功能、研究意義和價值的蛋白質(zhì)通常是一些含量很小、穩(wěn)定性差的低豐度蛋白質(zhì)或多肽。隨著蛋白質(zhì)檢測技術(shù)的發(fā)展，檢測方法的靈敏度越來越高，也對樣品前處理方法提出了更高的要求，如何在處理樣品過程中保留這些蛋白質(zhì)或多肽就變得越來越重要。
因此采用一種快速、有效的樣品穩(wěn)定方法，盡量縮短樣品采集與穩(wěn)定之間的間隔時間并將樣品前處理過程標準化，對于蛋白質(zhì)研究具有重要意義。高質(zhì)量的樣品前處理有利于獲得高質(zhì)量的數(shù)據(jù)，進而增強分析結(jié)果的可靠性和可比性。
Stabilizor系統(tǒng)是瑞典Denator公司的生物樣品穩(wěn)定技術(shù)。該系統(tǒng)包含Stabilizor T1主機和Maintainor樣品卡，用于解決蛋白質(zhì)離體降解的難題。Stabilizor系統(tǒng)能快速、均勻、準確的將熱量傳遞給樣品，破壞蛋白質(zhì)中的氫鍵，保留氨基酸鏈的共價肽鍵，即破壞蛋白質(zhì)的二級及以上結(jié)構(gòu)，保留一級結(jié)構(gòu)的完整性。這種不可逆的失活效應(yīng)將樣品中的各種酶類失活，從而將蛋白質(zhì)離
● 處理時間短，一般在一分鐘以內(nèi)即可將樣品中的各種酶類失活
● 有利于保留樣品在活體內(nèi)蛋白質(zhì)的磷酸化和其它翻譯后修飾的真實狀態(tài)，保留不穩(wěn)定、易降解的低豐度蛋白質(zhì)
使用Stabilizor系統(tǒng)無需添加輔助抑制試劑即可性的去除蛋白酶和磷酸酶的活性，防止蛋白質(zhì)降解發(fā)生。降低蛋白質(zhì)組的復(fù)雜性，減少高豐度蛋白質(zhì)降解片段的干擾，增加分析和發(fā)現(xiàn)具有重要價值的蛋白質(zhì)/多肽生物標記物的可能性。Stabilizor處理樣品具有的穩(wěn)定性、標準化和可追溯性，更易得到高質(zhì)量的分析數(shù)據(jù)。
液氮速凍結(jié)合酶抑制劑是目前廣泛使用的阻止樣品降解的標準方法。但這種方法會破壞細胞膜和細胞結(jié)構(gòu)，使得樣品融化后，降解和修飾蛋白質(zhì)的酶分布得更廣泛，導(dǎo)致更多蛋白質(zhì)或其修飾形式發(fā)生改變。而且這種方法具有可逆性和選擇性，無法全面的阻止樣品中酶類的活性，添加的試劑還會干擾后期樣品分析，部分試劑具有一定毒性。
使用Stabilizor系統(tǒng)的優(yōu)勢：
● 是一種純物理的樣品穩(wěn)定方法，不需使用干擾后期分析的酶抑制劑● 處理時間短，一般在一分鐘以內(nèi)即可將樣品中的各種酶類失活
● 有利于保留樣品在活體內(nèi)蛋白質(zhì)的磷酸化和其它翻譯后修飾的真實狀態(tài)，保留不穩(wěn)定、易降解的低豐度蛋白質(zhì)
● 避免了樣品中低豐度蛋白質(zhì)或多肽受高豐度蛋白質(zhì)降解片段的干擾，有助于發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)、多肽以及它們的修飾形式
● 性的去除蛋白酶和磷酸酶的活性，樣品經(jīng)穩(wěn)定后，即可在常溫下進行制備操作，無需擔心酶對蛋白質(zhì)、多肽的降解或改變它們的修飾形式
● 降低蛋白質(zhì)組的復(fù)雜程度，縮小動態(tài)范圍，增加分析和發(fā)現(xiàn)具有重要價值的蛋白質(zhì)或多肽生物標記物的可能性
● 使用方便，在采樣的同時即可穩(wěn)定樣品，縮短樣品離體降解的時間
● 樣品采集和儲存的過程高度標準化，使分析結(jié)果更加可靠，數(shù)據(jù)更具可比性，便于進行比較蛋白質(zhì)組研究
● 使用MALDI-MSI檢測目標蛋白質(zhì)或多肽，Stabilizor是目前有效的樣品穩(wěn)定方法
技術(shù)參數(shù)：
Stabilizor T1主機
● 4.3英寸彩色觸摸顯示屏
● 對樣品卡施加真空壓力范圍：10—100mbar
● 噪音：低于45分貝
● 樣品尺寸測量激光分級：CLASS 1藍色激光
● 內(nèi)置處理器：1 GHz×86，內(nèi)存為1GB
● 操作系統(tǒng)：Linux開源軟件
● 三個USB接口
● 外部尺寸（L×W×H）：465×306×143mm
● 凈重： 6.7kg
● 功率：為350瓦，正常使用為70瓦，待機為20瓦
● 電源：100-240V/50-60Hz
● 使用環(huán)境溫度：10—40℃
● 使用環(huán)境相對濕度：80%（無凝結(jié)）
● 4.3英寸彩色觸摸顯示屏
● 對樣品卡施加真空壓力范圍：10—100mbar
● 噪音：低于45分貝
● 樣品尺寸測量激光分級：CLASS 1藍色激光
● 內(nèi)置處理器：1 GHz×86，內(nèi)存為1GB
● 操作系統(tǒng)：Linux開源軟件
● 三個USB接口
● 外部尺寸（L×W×H）：465×306×143mm
● 凈重： 6.7kg
● 功率：為350瓦，正常使用為70瓦，待機為20瓦
● 電源：100-240V/50-60Hz
● 使用環(huán)境溫度：10—40℃
● 使用環(huán)境相對濕度：80%（無凝結(jié)）
Maintainor樣品卡
● 外部尺寸（L×W×H）：85×54×2mm
● 樣品腔尺寸：高7mm，直徑33mm
● 使用環(huán)境相對濕度：85%（無凝結(jié)）
● 材質(zhì)：PC，帶特氟龍涂層
● 適用溫度：-80—100 ℃
● 外部尺寸（L×W×H）：85×54×2mm
● 樣品腔尺寸：高7mm，直徑33mm
● 使用環(huán)境相對濕度：85%（無凝結(jié)）
● 材質(zhì)：PC，帶特氟龍涂層
● 適用溫度：-80—100 ℃
Stabilizor系統(tǒng)有助于揭示真正的蛋白質(zhì)組、多肽組和磷酸化圖譜
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