免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
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英文名稱 Anti-Cyp2-j3
中文名稱 細胞色素P450Ⅱj3抗體規格
別 名 cytochrome P450, family 2, subfamily j, polypeptide 3; Cyp2J3; cytochrome P450 monooxygenase; Cyp2j9; cytochrome P450, family 2, subfamily j, polypeptide 9; cytochrome P450, family 2, subfamily j, polypeptide 3; CYPIIJ3; cytochrome P450 2J3.
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
產品類型 一抗
研究領域 心血管 細胞生物 免疫學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 55kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Cyp2-j3
亞 型 IgG
免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+”表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++”以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
小鼠L-Selectin Mouse L-Selectin ELISA kit 規格: 96T/48T 原裝、分裝
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小鼠白介素-9(IL-9)試劑盒,ELISA分析檢測試劑盒 Mouse Interleukin-9,IL-9 ELISA KIT 規格: 96T/48T 原裝、分裝
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人甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人甲狀腺抗體(TAb)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人假定蛋白LOC433328 ELISA試劑盒規格:96T/48T
人假定蛋白LOC677168 ELISA試劑盒規格:96T/48T
細胞色素P450Ⅱj3抗體規格猴不對稱二甲精氨酸(ADMA)酶聯免疫吸附測定試劑盒 CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質激素釋放因子
猴白介素9(IL-9)酶聯免疫吸附測定試劑盒CSIG(cellular senescence inhibited gene) 衰老抑制因抗原
猴多巴色素異構酶(DT)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Cripto-1(N-Terminus) 畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關肽)N端
猴蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M1(M-AChRM1)酶聯免疫吸附測定試劑盒Cripto-1(C-Terminus) 畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關肽)C端
猴αL艾杜糖酸酶(IDUα)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原
猴外質金屬蛋白酶誘導因子(EMMPRIN/CD147)酶聯免疫吸附測定試劑盒Calcitonin peptide 降鈣素抗原
猴β內啡肽受體(β-EPR)酶聯免疫吸附測定試劑盒CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端結合蛋白1抗原
猴谷胱甘肽S轉移酶μ2(GSTμ2/GSTm2)酶聯免疫吸附測定試劑盒CTLA-4/CD152(cytotoxic T-lymphocyte associated Anti-gen-4) 淋巴相關抗原4/性T抗原-4抗原