產品品牌：ZCIBIO（茁彩生物）

產品名稱： 人血紅蛋白β亞基（HB-β）ELISA試劑盒

英文名稱：Human HB-β ELISA kit

產品規格：48T/96T

實驗樣本：血清、血漿、組織、細胞上清或其他生物樣本

應用領域： 人血紅蛋白β亞基（HB-β）ELISA試劑盒僅供科研實驗使用，不得用于臨床診斷

我的標準曲線是平的或者是非線性的，這可能是由于什么原因引起的？
引起不理想的標準曲線的原因有很多，常見的原因例舉如下：
◆ 確定稀釋是否得當。
◆ 確定波長是否正確。
◆ 標準品和樣品必需在15-20分鐘內滴加入板內。（除非試劑盒內說明書特別說明）
◆ 檢查背景是否過高。
◆ 確定酶標板是否正確洗滌。 不恰當的洗滌可能會引起具有高背景的平直曲線。
◆ 在測定過程中重復讀板。在超過建議時間后讀板會導致錯誤的結果。
◆ 如果高的標準品的讀數超過了酶標儀的范圍，確定標準品是否正確溶解，孵育時間和溫度是否準確。
◆ 為保證實驗準確性請重復測定。
◆ 如果使用對照，對照的濃度必須在測定范圍內。
◆ 在檢測和孵育過程中確定試劑沒有被污染。
◆ 沒有任何信號的平直標準曲線可能是由于酶結合物或者底物沒有反應。 檢查各個操作過程
◆ 由于許多酶標儀的限制，因此建議標準品檢測由高向低做復孔。

將目標抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的目標連接于固相載體上的抗體結合，然后加入微生物化的目標抗體，將未結合的生物抗體洗凈后，加入HRP標記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。  

1. 樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于2-8℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1 個月內檢測)，或-80℃(3-6個月內檢測)，避免反復凍融。

2. 試劑盒檢測范圍不等同于樣本的濃度范圍，如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品高值，請根據實際情況，做適當倍數稀釋(建議查閱文獻后先做預實驗，以確定稀釋倍數)。

3. 若所檢樣本不在說明書所列樣本之中，建議做預實驗驗證其檢測有效性。

4. 若使用化學裂解液制備組織勻漿或細胞提取液,由于引入某些化學物質會導致ELISA測值出現偏差。

5. 若樣本為細胞培養上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態、細胞數量、采樣時間等，所以可能存在不被檢出情況。

6. 某些重組蛋白可能與試劑盒中捕獲或檢測抗體不匹配而出現不被檢出的情況.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

從今日起，凡購買上海茁彩生物品牌的Elisa試劑盒，均可提供免費待測服務，為您提供專業的指導，在Elisa實際操作過程中，如遇到任何問題均可咨詢。