注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 甲型H1N1流感病毒(2009)PCR檢測(cè)試劑盒 |
規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | CP99101 |
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 專(zhuān)用反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到95%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為95%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
α紅細(xì)胞分化相關(guān)因子抗體
血管緊張素激活蛋白1抗體
Alpha清蛋白抗體
AFAP1L2抗體
神經(jīng)細(xì)胞分化相關(guān)蛋白AHNAK抗體
粘合連接相關(guān)蛋白1抗體
去整合素樣金屬蛋白酶13抗體
聚集蛋白抗體
轉(zhuǎn)錄因子AP2α+β抗體
磷酸化腺瘤樣息肉抗體
磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體
細(xì)胞周期后期促進(jìn)蛋白亞基10抗體
細(xì)胞周期后期促進(jìn)蛋白亞基11抗體
腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2抗體
磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體
DNA修復(fù)酶相互作用蛋白抗體
脂肪細(xì)胞膜相關(guān)蛋白抗體
載脂蛋白A1結(jié)合蛋白抗體抗體
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物1抗體
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物2抗體
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3B抗體
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3C抗體
載脂蛋白C1抗體
載脂蛋白C2抗體
載脂蛋白L1抗體
載脂蛋白L4抗體
小鼠核轉(zhuǎn)錄因子p65(mouse NF-kBp65) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠硝基(mouse Nitrotyrosine) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠神經(jīng)肽Y(mouse NPY) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(mouse NGF) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素3(mouse NT-3) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素4(mouse NT-4) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠一氧化氮(mouse NO) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠骨保護(hù)素(mouse OPG) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠骨橋素(mouse OPN) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
甲型H1N1流感病毒(2009)PCR檢測(cè)試劑盒小鼠骨鈣素(mouse Osteocalcin) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥(niǎo)苷酸(mouse 8-OHdG) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。