實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求：
① 易揮發、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
線粒體檸檬酸(MCA）含量測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6583 |
商品介紹：
測定意義: CA是線粒體三羧酸循環的個中間產物，由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成，其含量是三羧酸循環強度的主要指標之一。 配合測定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量，其中（1）丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進行程度，（2）綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況，（3）乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環進行狀況。 測定原理： CA在檸檬酸裂解酶的作用下，生成α-酮酸（草酰乙酸）；在弱酸性條件下，α-酮酸進一步與苯肼反應，生成相應的α-酮酸苯腙；α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰，該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。 自備儀器和用品： 可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液槍、1mL石英比色皿、研缽和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據待檢測樣品(包括標準品) 數量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現稀釋現使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
1個 1 uL超微量分光光度計 常溫
100次 胎盤堿性檢測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH8.0 MES Buffer,0.5M,pH8.0 常溫保存
100次 兩棲和爬行類動物種屬鑒定PCR Mix(線粒體CO1基因） Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMA-27s-2 pMA-27s-2 低溫運輸，-20℃保存
磁細菌分離培養基 Media for isolation of magnetotactic bacteria 100g
1瓶 SF767細胞株 SF767 低溫運輸和保存
疊氮葡萄糖肉湯 250g
5g β- 環狀糊精 β-Cyclodextrin 室溫干燥保存
50T 布魯氏菌PCR試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
10mL SDS-PAGE上樣液，5× SDS-PAGE Loading Buffer，5× -20℃保存
線粒體檸檬酸(MCA）含量測試盒微量法LRRC10 富含亮重復蛋白10抗體 規格: 0.2mlDnmt3a DNA甲基轉移-3α抗體 規格: 0.2ml
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr579) 磷酸化小板源性生因子受體B抗體 規格: 0.1mlCyclin H 周期素H抗體 規格: 0.2ml
IRAK4 白介素-1受體相關激4抗體 規格: 0.2mlAT1R/AGTR1 管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 規格: 0.1ml
MMP-9 基質金屬蛋白9抗體 規格: 0.1mlMCM3 微小染色體維持缺陷蛋白3抗體 規格: 0.2ml
Phospho-Btk(Ser180) 磷酸化蛋白酪激ATK抗體 規格: 0.1mlphospho-Gria2 (Ser880) 磷酸化谷受體2抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgG/FITC FITC標記的兔抗雞IgG 規格: 0.3mlKIF1B 驅動蛋白家族成員1B抗體 規格: 0.2ml
Astrocyte 人星形膠質細胞抗體 規格: 0.2mlSLC16A3/MCT4 單羧酸轉運蛋白3/4抗體 規格: 0.2ml
CD98 CD98重鏈抗原抗體 規格: 0.1mlGNLY/NKG5 顆粒溶素抗體 規格: 0.1ml
Phospho-EGFR (Tyr1101) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規格: 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/FITC FITC標記的小鼠抗羊IgG 規格: 0.3ml
Exportin 5 核輸出蛋白5抗體 規格: 0.2ml
BECN1L1 Bcl-2同源結構域樣蛋白1抗體 規格: 0.2ml
