特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱：檸檬酸（CA）含量測試盒可見分光光度法
產品規格：50管/48樣
檢測方法：可見分光光度法
產品貨號：BK-01S6574
產品分類：三羧酸循環系列
商品介紹：
測定意義: CA又稱枸櫞酸，廣泛存在于各種生物胞質中，是生物體內重要的有機酸。CA也存在于線粒體基質中，是三羧酸循環步反應的產物，與脂肪、蛋白質和糖最終轉化為二氧化碳密切相關。 測定原理 酸性條件下，檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+，在545nm處有特征吸收峰；通過測定545nm吸光值的增加，即可計算出樣品中檸檬酸含量。 實驗中所需儀器及設備 可見分光光度計、低溫離心機、掌上離心機、可調式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
0.1mL×10 0化學感受態細胞 0 Competent Cell -80℃保存
2 ug pNTAP- B pNTAP- B 低溫運輸，-20℃保存
MS培養基（不含瓊脂和蔗糖） 250g
2 ug pLVX-IRES-ZsGreen1 pLVX-IRES-ZsGreen1 低溫運輸，-20℃保存
XLT4瓊脂 XLT4 Agar 250g
10mL 弗氏*佐劑 Freund Adjuvant Complete 4℃保存
50T 古典豬瘟病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
200mL HRP 穩定劑/ 稀釋劑 HRP Stablizing Solution -20℃保存
2 ug YEP365 YEP365 低溫運輸，-20℃保存
10g 酸洗玻璃珠(直徑：800μm) 常溫
2 ug pAcHLT-B pAcHLT-B 低溫運輸，-20℃保存
檸檬酸（CA）含量測試盒可見分光光度法Securin/PTTG 垂體瘤轉化基因抗體 規格: 0.1mlALR 肝再生增強因子抗體 規格: 0.1ml
BMP10 骨形態發生蛋白10抗體 規格: 0.2mlIGFBP9/CCN3 胰島素樣生因子結合蛋白9 規格: 0.1ml
Smad2 細胞信號轉導分子Smad-2抗體 規格: 0.1mlPOT1 端粒保護蛋白1抗體 規格: 0.2ml
MTTP 微粒體甘油三酯轉運蛋白 規格: 0.2mlAnnexin A8 膜粘連蛋白8抗體 規格: 0.1ml
PCDHA3 原鈣粘附蛋白α3抗體 規格: 0.2mlMouse Anti-human IgG/HRP 辣根過氧化物標記的小鼠抗人IgG 規格: 0.1ml
DEPTOR/DEPDC6 DEPTOR蛋白抗體 規格: 0.2mlRb/P105 RB 成視網膜細胞瘤基因抗體 規格: 0.1ml
phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317) 磷酸化酪蛋白激受體B1抗體 規格: 0.1mlDHRS7 視網膜短鏈脫/還原家族7抗體 規格: 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗水貂IgG 規格: 0.1mlGMCL1L 生細胞樣蛋白1樣蛋白抗體 規格: 0.2ml
Phospho-CEBP beta (Ser105) 磷酸化轉錄調節因子CEBP β抗體 規格: 0.1mlC12ORF68 12號染色體開放閱讀框68抗體 規格: 0.2ml
C4orf42 4號染色體開放閱讀框42抗體 規格: 0.2mlPhospho-SirT1 (Ser27) 磷酸化沉默調節蛋白1抗體 規格: 0.1ml
IDE 胰島素降解抗體 規格: 0.2mlIL-29/IFNL1 白細胞介素29抗體 規格: 0.2ml
TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase 端粒調節相關蛋白抗體 規格: 0.1ml
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
