實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求：
① 易揮發、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
磷酸丙糖異構酶（TPI）測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6617 |
商品介紹：
測定意義: 磷酸丙糖異構酶是重要的糖酵解酶，廣泛存在于動植物及微生物體內，在機體內參與葡萄糖代謝，在糖酵解，糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發揮著重要作用。 測定原理 磷酸丙糖異構酶將磷酸二羥丙酮轉化為3-磷酸甘油醛，3-磷酸甘油醛與NAD在3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH，340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構酶的活性的高低。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據待檢測樣品(包括標準品) 數量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現稀釋現使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
氯、碘中和劑管 9ml*20
250mL 超敏化學發光（HRP）檢測試劑盒 Ultrasensitive ECL Kit 4℃保存
2 ug TetO-FUW-OSKM TetO-FUW-OSKM 低溫運輸，-20℃保存
500次 硅膠膜離心吸附柱再生液 Spin Column Recharger 常溫
2 ug pAc5.1B-EGFP pAc5.1B-EGFP 低溫運輸，-20℃保存
大豆酪蛋白瓊脂培養基（TSA） Tryptose Soya Agar 1kg
1瓶 Bel-7404細胞株 Bel-7404 低溫運輸和保存
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)顆粒 Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 300ml/袋*10
100次 即用型EMSA試劑盒 EMSA Kit -20℃保存
250mL NP40 Permeating Solution in TBS,10X（NP40滲透液，10X） NP40 Permeating Solution in TBS,10X 常溫保存
0.1mL×10 Rosetta (DE3) 感受態細胞 Rosetta(DE3) Competent Cell -80℃保存
磷酸丙糖異構酶（TPI）測試盒微量法phospho-MEK1(Thr286) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激1抗體 規格: 0.1ml
Frizzled 7/FZE3 卷曲蛋白FZD7抗體 規格: 0.1ml
CD170/Siglec-5 唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體 規格: 0.1ml
phospho-MEK5(Ser129) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激5抗體 規格: 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/FITC FITC標記的驢抗人IgG 規格: 0.3ml
phospho-GIT1(Ser375) 磷酸化G蛋白偶聯受體激相互作用蛋白1 規格: 0.1ml
Thrombomodulin/CD141 栓調節蛋白抗體 規格: 0.1ml
Cytokeratin 5/CK5 細胞角蛋白5抗體 規格: 0.1ml
ECE1 內皮素轉化1抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗猴IgM 規格: 0.1mlLMBR1/DIF14 分化相關基因14抗體 規格: 0.2ml
Unrip/STRAP 絲/蘇激受體相關蛋白抗體 規格: 0.1mlphospho-Bcl 10(Ser218) 磷酸化Bcl-10抗體 規格: 0.1ml
Phospho-MEF2A (Ser408) 磷酸化肌細胞增強因子2抗體 規格: 0.1mlMARCH4 膜相關環指蛋白4抗體 規格: 0.2ml
