中文名稱：細胞凋亡染色試劑盒(細胞Hoechst染色)
英文名稱：Hoechst Staining Kit
產(chǎn)品規(guī)格：100次
產(chǎn)品貨號：LZ-01X6323
發(fā)貨周期：1～3天
商品介紹：
本試劑盒提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。細胞發(fā)生凋亡時，染色質(zhì)會固縮。所以Hoechst 33258染色后，在熒光顯微鏡下觀察，正常細胞的細胞核呈正常的藍色，而凋亡細胞的細胞核會呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染，顏色有些發(fā)白。 試劑盒特點： 1. 只需25分鐘即可完成細胞凋亡檢測的整個過程。 2. 本試劑盒提供了固定液，染色液，及抗熒光淬滅封片液。 3. 本試劑盒對貼壁細胞，懸浮細胞和組織切片均適用。 4. 足夠檢測100個樣品。 試劑盒組份： 固定液————————————50ml Hoechst 33258染色液 —————50ml 抗熒光淬滅封片液 —————— 5ml |
公司產(chǎn)品現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
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轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)英文名稱：TGFβ2 ELISA Kit自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體包裝10mg
轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)英文名稱：TGF-β1 ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝50mg
轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ1)英文名稱：TGFβ1 ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝25g
轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)英文名稱：TGF-α ELISA Kit磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g
轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)英文名稱：TGFα ELISA Kit磷化失調(diào)癥蛋白1抗體包裝1g
主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)英文名稱：MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體包裝5g
主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)英文名稱：MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g
主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)英文名稱：MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g
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腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)英文名稱：TGSF ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝5g
腫瘤壞死因子樣細胞凋亡弱誘導(dǎo)因子(TWEAK)英文名稱：TWEAK ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝100g
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體4(TRAIL-R4)英文名稱：TRAIL-R4 ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝25g
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)英文名稱：TRAIL-R3 ELISA Kit乙酰羧化抗體包裝100g
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)英文名稱：TRAIL-R1 ELISA Kit磷化乙酰羧化抗體包裝25g
磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體Pim-2原癌基因(PIM2)R406 (free base) is a potent Syk inhibitor with IC50 of 41 nM in a cell-free ass
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