注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：葡萄糖脫氫酶（GCDH)測(cè)試盒紫外分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測(cè)方法：紫外分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6766
產(chǎn)品分類：糖代謝系列
商品介紹：
測(cè)定意義: GCDH（EC 1.1.1.47）催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H，大量存在于高等動(dòng)物的肝臟和弱氧化醋桿菌中。在低聚果糖生產(chǎn)中使用GCDH，不僅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量，而且生成的葡萄糖酸與鈣離子結(jié)合生成的是一種理 想的補(bǔ)鈣制劑。因而，GCDH已成為制備高含量低聚果糖的理想用酶。 測(cè)定原理： GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH，在340nm下測(cè)定NADH上升速率，即可反映GCDH活性。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）顆粒 Tryptose Soya Agar 300ml/袋*10
10次 3'-RACE試劑盒 3'-RACE Kit -20℃保存
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH6.5 MOPSO Buffer,0.2M,pH6.5 常溫保存
100g Poly(vinyl Alchohol) 常溫保存
2 ug pMIR-REPORT pMIR-REPORT 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
多價(jià)蛋白胨 Polypeptone 250g
1瓶 SK-NEP-1細(xì)胞株 SK-NEP-1 低溫運(yùn)輸和保存
高鹽瓊脂 Mannitol Salt Agar 250g
5g 2,5- 二苯基惡唑 2,5-Diphenyloxazole（PPO） 室溫保存
50T PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
100mL 酪蛋白溶液 Casein Blocking Solution -20℃保存
葡萄糖脫氫酶（GCDH)測(cè)試盒紫外分光光度法Neurogenin 2/NGN2 神經(jīng)元素2抗體 規(guī)格: 0.1mlCTAGE4 皮膚T細(xì)胞相關(guān)抗原4抗體 規(guī)格: 0.2ml
FIS1/TTC11 線粒體裂變1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCD11b/Integrin αM/Integrin Alpha M 整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體 規(guī)格: 0.1ml
T7 tag T7 tag標(biāo)簽抗體 規(guī)格: 0.1mlCIP2A/p90 Autoantigen 蛋酸PP2A抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
CXXC5 二硫鍵氧化還原鋅指蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SRC-3 (Thr24) 磷酸化類固醇受體輔助活化因子-3 規(guī)格: 0.1ml
P14ARF/CDKN2A 抑基因p16抗體 0.1mlox-LDL 氧化脂蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
P450 1A2/CYP1A2 細(xì)胞色素P450 1A2抗體 規(guī)格: 0.2mlAQP0/MIP26 水通道蛋白0抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.5mlPAR3 蛋白激活受體3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Musashi 1/Msi1 神經(jīng)干細(xì)胞RNA結(jié)合蛋白Musashi1抗體 規(guī)格: 0.2mlAngiopoietin 2/ANG2 管生成素2抗體 規(guī)格: 0.1ml
LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 規(guī)格: 0.1mlCD137/TNFRSF9 瘤壞死因子受體超家族成員9抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD64/IGFR1 免疫球蛋白G Fc段受體I 規(guī)格: 0.1mlLRRC15 富含亮重復(fù)蛋白15抗體 規(guī)格: 0.2ml
M2-PK/PKM2 丙酮酸激-M2抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml
CNO/Cappuccino Cappuccino蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlILDR1 免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml
