特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱：漆酶測試盒可見分光光度法
產品規格：50管/24樣
檢測方法：可見分光光度法
產品貨號：BK-01S6938
產品分類：其它系列
商品介紹：
測定意義: 漆酶（Laccase）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。 測定原理 漆酶分解底物ABTS產生ABTS自由基，在420nm處的吸光系數遠大于底物ABTS，測定ABTS自由基的增加速率，可計算得漆酶活性。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
1 管 BL21(DE3)plysS大腸桿菌 BL21(DE3)plysS E.coli Strain -80℃保存
2 ug pBaBe-puro pBaBe-puro 低溫運輸，-20℃保存
HBI創傷弧菌生化鑒定條(GB) 5條/盒
250ML MABT Washing Solution,5X MABT Washing Solution,5X 常溫保存
DG-18瓊脂 DG-18 Agar 250g
10g L-(+) 乳酸鋰鹽 Lithium L-Lactate 室溫干燥保存
50T 貓PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
5mL 少突膠質細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
100mL BES Buffer,0.5M,pH7.4 BES Buffer,0.5M,pH7.4 常溫保存
10mL 微量核酸沉淀劑 NA Precipitation Solution 室溫保存
2 ug pGEX-2TK2-Linker pGEX-2TK2-Linker 低溫運輸，-20℃保存
漆酶測試盒可見分光光度法Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相關基因NDRG1抗體 規格: 0.1mlZO-1 胞質緊密粘連蛋白1抗體（閉鎖小帶蛋白1） 規格: 0.1ml
COBLL1 Cordon bleu蛋白樣1抗體 規格: 0.2mlPhospho-MEK1/2(Ser218/222) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 規格: 0.1ml
MMP-11 基質金屬蛋白-11抗體 規格: 0.1mlCNTNAP3 接觸蛋白相關蛋白3抗體 規格: 0.2ml
GPD2 線粒體甘油三磷酸脫2抗體 規格: 0.2mlPhospho-PKR (Thr446/451) 磷酸化蛋白激R抗體 規格: 0.1ml
phospho-LKB1(Ser428) 磷酸化絲/蘇蛋白激抗體 規格: 0.1mlPhospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷爾蒙敏脂肪抗體 規格: 0.1ml
CXorf36 脫羧蛋白體36抗體 規格: 0.2mlDRD1 多巴胺受體D1抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗人分泌型IgA 規格: 0.1mlRabbit Anti-human IgM/FITC FITC標記的兔抗人IgM 規格: 0.3ml
GPRIN2 G蛋白調節誘導神經突增生蛋白2抗體 規格: 0.2mlGDNF Receptor alpha 2 膠質細胞系源性神經營養因子受體α2抗體 規格: 0.1ml
PEPT1 腸道肽轉運蛋白1/小肽轉運蛋白1抗體 規格: 0.1mlLASS1 壽相關基因lASS1抗體 規格: 0.2ml
phospho-CPLA2(Ser505) 磷酸化胞漿型磷脂A2抗體 規格: 0.1mlTYRO3/MER+SKY 受體酪激抗體 規格: 0.2ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的小鼠抗兔IgM 規格: 0.1mlmucin3/Muc3 粘蛋白-3抗體 規格: 0.2ml
KCNG2 心臟鉀離子通道蛋白亞基2抗體 規格: 0.2mlGLP-1 (7-36) 素樣肽-1抗體 規格: 0.1ml
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
