英文簡稱:UMNSAH/DF-1細胞
產品名稱:雞胚胎成纖維細胞;UMNSAH/DF-1
規格:T25
形態特性:成纖維母細胞樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:
培養條件:DMEM(高糖)+10%FBS(gibco)
傳代方法:1:2傳代
貨號:CS-X63213
公司產品僅用于科研公司有大量的優質細胞,還提供細胞的全程后期服務,可以向專業人士咨詢詳細的細胞培養條件,凍存方法,及相關培養技術。
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
細胞培養操作規范:
主要功能:
(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應。
(3)與血管疾病的進展和穩定有關。
生理變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細胞培養末期液氮凍存。
(4)每凍存管細胞數:>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
4-(2-羥乙)吡啶仰孔菌拉丁屬名: Penicillium polonicum
4-(2-羥乙)吡啶波蘭青霉拉丁屬名: Chaetomium funicola
4-溴-3-繩生毛殼拉丁屬名: Kurthia gibsonii
7--6-硝-4-羥喹唑啉吉氏庫特菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
7--6-硝-4-羥喹唑啉釀酒酵母拉丁屬名: Escherichia coli
2-氨煙大腸埃希氏菌拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
2-氨煙佛雷德里克斯堡假單胞菌用途: 微生物肥料
2-氨煙Bacillus aryabhattai 用途: 食用
10-溴-1-癸平菇拉丁屬名: Escherichia coli
10-溴-1-癸大腸埃希氏菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
D-纖維二糖八乙酯栗疫菌拉丁屬名: Penicillium griseoroseum
D-纖維二糖八乙酯灰玫瑰青霉拉丁屬名: Acremonium murorum
異麥芽糖墻支頂孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
4,5-二鄰苯二蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Cohnella panacarvi
4,5-二鄰苯二科恩氏菌拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus
N-苯鄰苯二球形賴氨芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
UMNSAH/DF-1細胞神經元素2抗體珍珠母(標準品) Antipyrine
抑癌因NDRG3抗體正丁苯酞;丁酞內酯(標準品) Thymol
有絲分裂氧化酶1抗體正二十九烷 Fluorescein disodium salt
NADPH oxidase 3抗體芝麻林素(標準品) 2-Methyl-5-nitroimidazole
NADPH氧化酶NOX家族的成員4抗體芝麻素(標準品) Dihydralazine sulphate
分裂周期相關蛋白1抗體知母(標準品) Amitriptyline HCl
NFAM1抗體知母皂苷A1 IPRATROPIUM BROMIDE
環指蛋白67抗體知母皂苷A3(標準品) DL-Lysine Acetylsalicylate
神經母瘤抑瘤蛋白1抗體知母皂苷BII(標準品) Guaifenesin
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡,co2孵箱。
1.2 細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線。