抗體的定義:
抗體(antibody),(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細胞(效應(yīng)B細胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細胞的細胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個*特征,該外來目標(biāo)被稱為抗原。
動物抗體功能分類:
①豬抗體:豬瘟抗體,豬藍耳抗體,豬圓環(huán)病毒抗體,豬偽狂犬抗體,豬細小病毒抗體,豬口蹄疫抗體,豬流感抗體等。
②禽抗體:小鵝瘟抗體,鴨肝抗體抗體,鴨漿膜炎抗體,禽流感抗體,新城疫抗體等
③牛抗體:牛口蹄疫抗體,奶牛乳房炎抗體,牛流行熱抗體,牛病毒性腹瀉抗體,牛出血性敗血癥抗體等
④羊抗體:羊痘抗體,羊口蹄疫抗體,羊小反芻獸疫抗體,羊快疫抗體,羊腸毒血癥抗體,羊猝疽抗體,羊黑疫抗體等。
⑤犬抗體:犬狂犬病抗體、犬瘟熱抗體、犬副流感抗體、犬腺病毒抗體與犬細小病毒病抗體,狐貉水貂的偽狂犬抗體、細小病毒抗體、乙腦抗體等。
前纖維蛋白2抗體產(chǎn)品應(yīng)用
英文名稱 Anti-Profilin 2
中文名稱 前纖維蛋白2抗體
別 名 D3S1319E; PFL; PFN 2; PFN2; Profilin II; Profilin-2; Profilin2; ProfilinII.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 16kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from rat Profilin 2 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
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