注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
類天花病毒PCR檢測試劑盒廠家 | Alastrim VirusPCR | BK-P8777 |
原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
大蒜素（UV98%) CAS 539-86-6 * 規格： 20mg
去氫駱駝蓬堿 CAS 442-51-3 * 規格： 20mg
白蘞對照藥材 CAS * 規格： 1g
奎寧 CAS 130-95-0 * 規格： 20mg
維生素K3 CAS 58-27-5 * 規格： 20mg
牛蒡子對照藥材 CAS * 規格： 1g
天冬對照藥材 CAS * 規格： 1g
薯蕷皂苷元 CAS 512-04-9 * 規格： 20mg
大黃素甲 CAS 521-61-9 * 規格： 20mg
穿琥寧 CAS * 規格： 20mg
５,７-二羥基色原 CAS 31721-94-5 * 規格： 10mg
巴蘇木素 CAS 474-07-7 * 規格： 10mg
乙酰紫堇靈 CAS 18797-80-3 * 規格： 20mg
對照藥材 CAS * 規格： 1g
酪醇 CAS 501-94-0 * 規格： 20mg
類天花病毒PCR檢測試劑盒廠家三正已鋁 282.48 Have aluminum tri*：1116-73-0分子量： C18H39Al
5-溴-2-氯氟 209.44 5- bromo -2- chlorofluorobenzene*：60811-18-9分子量： C6H3BrClF
4-甲茴香硫醚 138.23 4- methyl sulfide*：623-13-2分子量： C8H10S
3-甲酰三氟甲硼酸鉀 212.018 3- a three f*：871231-44-6分子量： C7H5BF3O.K
漆黃素 Lacquer 286.24分子量：C15H10O6*：528-48-3
齊墩果 Oleanolic acid 456.70032分子量：C30H48O3*：508-02-1
Dibenzo(a,j)acridine Dibenzo (a, J) acridine 分子量：*：N#A733
二胺磺鈉 Two aniline sulfonic acid sodium 271.27分子量： C12H10NNaO3S*：6152-67-6
性48 Acid black 48 563.51分子量： C28H18N3NaO7S*：1328-24-1
2-氯-3',4'-二甲氧聯酰 304.725 2-, 4'-, -3'two, a*：56159-70-7分子量： C16H13ClO4
2-(2-羥)并噻唑 227.28 2- (2- hydroxyphenyl) benzothiazole*：3411-95-8分子量： C13H9NOS
技術原理：
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。
