注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒廠家 | Acanthamoeba spp.PCR | BK-P8745 |
原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經過n個熱循環擴增，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
斯皮諾素 CAS 72063-39-9 * 規格： 20mg
人參皂苷F2 CAS 62025-49-4 * 規格： 20mg
5-羥基-7,8-二甲氧基黃 CAS 3570-62-5 * 規格： 10mg
3-O-沒食子酰粘酸 CAS * 規格： 10mg
木犀草素 CAS 491-70-3 * 規格： 20mg
雷公藤乙素 CAS 38647-10-8 * 規格： 20mg
梔子苷 CAS 24512-63-8 * 規格： 20mg
黃楊堿 CAS 860-79-7 * 規格： 20mg
異去氫鉤藤堿 CAS 51014-29-0 * 規格： 20mg
石蒜堿 CAS 476-28-8 * 規格： 20mg
麥冬皂苷D CAS 945619-74-9 * 規格： 20mg
黨參炔苷 CAS 136085-37-5 * 規格： 10mg
催吐蘿芙木定 CAS 3911-19-1 * 規格： 10mg
川陳皮素 CAS 10236-47-2 * 規格： 20mg
7-表-10-去乙酰基紫杉醇（95%） CAS 78432-77-6 * 規格： 20mg
多食棘阿米巴屬通用PCR檢測試劑盒廠家2-氯-6-甲氧喹啉 193.63 2- -6-, a*：13676-02-3分子量： C10H8ClNO
4-甲-3-溴吡 172.02 4- methyl -3-*：3430-22-6分子量： C6H6BrN
N-乙-4-甲酸甲酯 N- ethyl -4- methyl piperidine*：分子量：
1,3-二氟 114.09 Two - 1,3-*：372-18-9分子量： C6H4F2
育亨賓 Yohimbine hydrochloride 390.90368分子量：C21H27ClN2O3*：65-19-0
三氟甲磺酸銅 361.67 三氟甲磺酸銅*：34946-82-2分子量： C2CuF6O6S2
1-甲-4-(三丁錫)-1H-吡唑 371.14868 1- methyl -4- (three butyl tin) -1H- pyrazole*：179055-21-1分子量： C16H32N2Sn
2--4-氯嘧 129.55 2- amino -4-*：3993-78-0分子量： C4H4ClN3
2,5-二氟溴 192.99 2,5- two fluorine bromine*：399-94-0分子量： C6H3BrF2
奧達唑 249.27 Up to*：20559-55-1分子量： C12H15N3O3
考馬斯亮藍R250 Kaumas blue R250 825.97分子量： C45H44N3NaO7S2*：6104-59-2
技術原理：
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。
