特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱：脫氫酶(DHA)測試盒可見分光光度法
產品規格：50管/48樣
檢測方法：可見分光光度法
產品貨號：BK-01S6944
產品分類：其它系列
商品介紹：
測定意義: 脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶，催化底物通過細胞色素系統被氧化，釋放的能量供機體使用，是生物體取得能量的一種方式。 測定原理 在細胞呼吸過程中，氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在脫氫酶作用下接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF呈現紅色，于485nm測定其吸光值，即得脫氫酶活性。 自備實驗儀器及用品 天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、甲醇（不允許快遞，請用戶自備）。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
1%NaCl蔗糖 20支
2 ug pYES4NT/C pYES4NT/C 低溫運輸，-20℃保存
50次 M13噬菌體單鏈基因組DNAout
2 ug pET-24a(+) pET-24a(+) 低溫運輸，-20℃保存
PBS緩沖液（PH7.4） PBS Solution 250g
1瓶 4647細胞株 4647 低溫運輸和保存
1盒 無內毒素槍頭，1 mL
24 T 一氧化氮合成測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
250mL MES Buffer,1.0M,pH6.5 MES Buffer,1.0M,pH6.5 常溫保存
250ug lambda（λ） DNA（不含N6-甲基腺） Lambda DNA（λ DNA） -20℃保存
2 ug pQE-40 pQE-40 低溫運輸，-20℃保存
脫氫酶(DHA)測試盒可見分光光度法IKBKE/IKKi 核因子κB抑制蛋白E抗體 規格: 0.1ml
DECR1 線粒體2,4-雙烯酰輔A還原1抗體 規格: 0.1ml
phospho-c-Jun(Thr249) 磷酸化原基因c-Jun抗體 規格: 0.1mlphospho-G3BP1(Ser232) 磷酸化Ras GTP活化蛋白結合蛋白1抗體 規格: 0.1ml
Paxillin 樁蛋白Paxillin抗體 規格: 0.1mlCECR6 貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 規格: 0.2ml
REG1β/REG1 beta 胰島細胞再生因子β抗體 規格: 0.2mlASAM/ACAM 脂肪細胞特異性粘附分子抗體 規格: 0.1ml
CTRP1/G protein coupled receptor interacting protein 1 G蛋白偶聯受體相互作用蛋白1抗體（補體Clq TNF相關蛋白1） 規格: 0.2mlId1 DNA結合抑制因子1抗體 規格: 0.2ml
SLC27A1 鏈脂肪酸轉運蛋白1抗體 規格: 0.2mlDR6/CD358 瘤細胞調亡素/瘤壞死因子受體死亡受體6抗體 規格: 0.2ml
PDZD6 PDZ結構域PDZK6蛋白抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗猴IgG 規格: 0.1ml
NCF/NCF4/p40phox 嗜中性粒細胞胞漿因子4抗體 規格: 0.1mlCK I alpha/STK 絲/蘇蛋白質激抗體Casein kinase Ⅰα(CKⅠα) 規格: 0.1ml
SIRT6 沉默調節相關蛋白6抗體 規格: 0.2mlphospho-ERK5(Ser496) 磷酸化細胞外信號調節激5抗體 規格: 0.1ml
TSPAN2 四分子交聯體2抗體（四旋蛋白） 規格: 0.2mlMyelin PLP 髓磷酯髓鞘蛋白1抗體 規格: 0.2ml
JMJD2A/KDM4A/JHDM3A 組蛋白去甲基化JMJ2A抗體 規格: 0.2mlAlpha-Synuclein/Syn/SNCA 核突觸蛋白α抗體 規格: 0.1ml
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
