軟瓊脂克隆實驗原理:
細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數，但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。
由于細胞生物學性狀不同，細胞克隆形成率差別也很大，一般初代培養細胞克隆形成率弱 ，傳代細胞系強;二倍體細胞克隆形成率弱，轉化細胞系強;正常細胞克隆形成率弱，腫瘤細胞強。并且克隆形成率與接種密度有一定關系， 做克隆形成率測定時 ，接種細胞定要分散成單細胞暴液,直接接種在碟皿中，持續一周,隨時檢查，到細胞形成克隆時終止培養。
軟瓊脂克隆實驗基本步驟:
(1)取對數生長期細胞，用0.25%胰蛋白酶消化并輕輕吹打，使之成為單細胞，作活細胞計數，用含20%胎牛血清的DMEM培養液調整細胞密度至1x106細胞/L。然后根據實驗要求作梯度信數稀釋。
(2)用蒸餾水分別制備出1.2%和0.7%兩個濃度的低溶點瓊脂糖液,高壓滅菌后，維持在40°C中不會凝固。
(3)按1:1比例使1.2%的瓊脂糖和2xDMEM培養基(含有2x抗生素和20%的小牛血清)混合后,取3mL混臺液注入直徑6cm平皿中(10cm平皿加7-10mL)，冷卻凝固，可作底層瓊脂置CO2溫箱中備用。
(4)按1:1比例讓0.7%的瓊脂糖和2 xDMEM培養基在無菌試管中相混以后,再向管中加入0.2mL的細胞懸液，充分混勻，注入鋪有1.2%瓊脂糖底層平皿中，逐形成雙瓊脂層。待上層瓊脂凝固后，置入37C 5%CO2溫箱中培養10-14天。
(5)把平皿放置在倒置顯微鏡下,觀察細胞克隆數。計算形成率。
軟瓊脂培養法常用檢測腫瘤細胞和轉化細胞系。試驗中瓊脂與細胞相混時，瓊脂溫度不直超過40°C。接種細胞的密度 每平方厘來不超過35個，一股6cm的平皿接種1000個細胞。正常細胞在懸浮狀態下不能增殖，不適用于軟瓊脂克隆形成試驗。
伊萊博生物科技（上海）有限公司（簡稱，伊萊博生物），總部位于上海市長江軟件園，2024年1月與上海大學醫學院成立聯合研究中心，是一家以生命科學研究為基礎，專注于研究成果轉化及技術服務的創新型高科技企業。主要致力于為科研人員及機構提供專業的技術團隊和實驗平臺，建立包含腫瘤生物學、病理學、免疫學、細胞生物學、生物化學與分子生物學和動物實驗等學科的研究服務體系。
伊萊博生物擁有豐富的研究經驗，具備完善的系統化管理能力和科研服務體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米，擁有的儀器設備、細胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米，可滿足同時飼養清潔級和SPF級動物。核心實驗技術團隊主要來自中國科學院大學、復旦大學、上海交通大學等重點高校及科研機構，能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術支持。公司目前參與研究項目已經涵蓋心腦血管、腫瘤、內分泌、生殖、免疫、神經等諸多領域。
為了響應大力發展基礎研究的號召，推動生命科學領域的進步，伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優勢，提供培訓服務。通過實驗理論培訓和實踐相結合，充分了解科學研究和實驗操作的全過程，培訓規范的實驗操作、分析問題和解決問題的能力，分層次培養科研人才，為其今后的科研工作奠定堅實的基礎。
因為專業，所以值得信賴；因為專注，所以高速發展；堅持“誠信創新，互利共贏”的原則；朝著“解決科研問題”這一目標，伊萊博人將通過自身的努力，與一線科研人員共同推動生命科學的快速發展!
實驗技術服務
軟瓊脂克隆實驗 產品信息
關鍵詞：倒置顯微鏡
