環(huán)保在線>產(chǎn)品庫(kù)>生物試劑>生物檢測(cè)試劑>elisa試劑盒>>鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

參考價(jià)	面議

參考價(jià)

面議

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

公司名稱上海西格生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號(hào)50T
所在地上海市
廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間2020/10/15 14:08:32
訪問(wèn)次數(shù)383

產(chǎn)品標(biāo)簽:

鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

在線詢價(jià)收藏產(chǎn)品進(jìn)入展商展臺(tái)

聯(lián)系方式：簡(jiǎn)經(jīng)理18930344717查看聯(lián)系方式

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是環(huán)保在線上看到的信息，謝謝!

索取相關(guān)資料

公司介紹主營(yíng)產(chǎn)品

上海西格生物科技有限公司（Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd）是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。

上海西格生物科技有限公司（Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd）先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對(duì)各種動(dòng)物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。

公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù)，力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的，更專業(yè)的服務(wù)！

公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問(wèn)題可申請(qǐng)退換，有技術(shù)疑問(wèn)可隨時(shí)給于解答，一對(duì)一的客服服務(wù)，客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。

展開顯示更多內(nèi)容

生化試劑，ELISA試劑盒，血清，標(biāo)準(zhǔn)品，培養(yǎng)基，抗體，分子生物學(xué)，細(xì)胞，耗材

產(chǎn)品簡(jiǎn)介在線詢價(jià)

鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
上海西格生物相關(guān)產(chǎn)品:
MEI培養(yǎng)基Sandwich ELISA, Double Antibody亮酰-半胱酰肽酶檢測(cè)試劑盒天青II2-8 ℃ for 6 monthsT4 DNA連接酶/T4 DNA Ligase

鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱：鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
貨號(hào)：XG01P4332
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

實(shí)時(shí)定量PCR：
①β-actin陽(yáng)性模板的標(biāo)準(zhǔn)梯度制備陽(yáng)性模板的濃度為1011，反應(yīng)前取3μl按10倍稀釋（加水27μl并充分混勻）為1010，依次稀釋至109、108、107、106、105、104，以備用。
②反應(yīng)體系如下：
標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)體系
序號(hào) 反應(yīng)物劑量
1 SYBR Green 1 染料 10μl
2 陽(yáng)性模板上游引物F 0.5μl
3 陽(yáng)性模板下游引物R 0.5μl
4 dNTP 0.5μl
5 Taq酶 1μl
6 陽(yáng)性模板DNA 5μl
7 ddH2O 32.5μl
8 總體積 50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。

基因反應(yīng)體系：
序號(hào) 反應(yīng)物劑量
1 SYBR Green 1 染料 10μl
2 內(nèi)參照上游引物F 0.5μl
3 內(nèi)參照下游引物R 0.5μl
4 dNTP 0.5μl
5 Taq酶 1μl
6 待測(cè)樣品cDNA 5μl
7 ddH2O 32.5μl
8 總體積 50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。
③制備好的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品和檢測(cè)樣本同時(shí)上機(jī)，反應(yīng)條件為：93℃　2分鐘，然后93℃ 1分鐘，55℃ 2分鐘，共40個(gè)循環(huán)。
PCR特異性：
1.primers design
這是重要的一步。理想的，只同目的序列兩側(cè)的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面一些條件：
1)足夠長(zhǎng)，18～24bp，以保證特異性，當(dāng)然，不是說(shuō)越長(zhǎng)越好，太長(zhǎng)的primer同樣會(huì)降低特異性，并且降低產(chǎn)量；
2)GC%，40%~60%；
3)5'端和中間序列要多GC，以增加穩(wěn)定性；
4)避免3'端GCrich，個(gè)BASE不要有GC，或者5個(gè)有3個(gè)不要是GC。
5)避免3'端的互補(bǔ)，否則，容易造成DIMER；
6)避免3'端的錯(cuò)配；
7)避免內(nèi)部形成二級(jí)結(jié)構(gòu)；
8)附加序列(RT site，Promoter sequence)加到5'端，在算Tm值時(shí)不算，但在檢測(cè)互補(bǔ)和二級(jí)結(jié)構(gòu)要加上它們；
9)使用兼并primer時(shí)，要參考密碼子使用表，注意：生物偏好性，不要在3'端使用兼并primer，并使用較高的primer濃度(1μM～3μM)；
10)學(xué)會(huì)使用一種design software，PP5，Oligo6，DNA star，Vector NTI，Online design et al。

小鼠成纖維細(xì)胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

桿菌屬 Lactobacillus sp.膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum

成人表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

植物桿菌 Lactobacillus plantarum粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

人椎間盤髓核細(xì)胞*培養(yǎng)基RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞

尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

小鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

桿菌屬 Lactobacillus sp.光滑青霉 Penicillium glabrum

EB-3(人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

植物桿菌 Lactobacillus plantarum粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種 Bacillus thuringiensis subsp. KenyaeHCT-8/結(jié)腸細(xì)胞
鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒D-苯甘氨甲酯鹽鹽

D-苯甘氨甲酯鹽鹽

2-氟-L-苯丙氨

Atazanavir

9,9-辛基-2,7-溴基芴

(R)-(+)-3-羥基啶鹽鹽

FMOC-L-4-基苯丙氨

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液濃度和純度。

關(guān)鍵詞：分光光度計(jì)