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鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

參考價面議
具體成交價以合同協議為準
  • 公司名稱上海西格生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號50T
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質生產廠家
  • 更新時間2020/10/15 14:08:32
  • 訪問次數327
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上海西格生物科技有限公司(Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd)是一家生物企業,主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑的銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。


上海西格生物科技有限公司(Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd)先后與天津中醫學院、復旦大學、上海交通大學醫學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫大學、南京大學,暨南大學,南京工業大學,曙光醫院、華山醫院、瑞金醫院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質、信守承諾、積極溝通、創新服務”的企業文化積極參與生物領域的技術創新和技術服務,力求為我國科研事業更好的,更專業的服務!


公司售后服務宗旨:有質量問題可申請退換,有技術疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務,客戶的需求也是我們不斷的更新服務。











生化試劑,ELISA試劑盒,血清,標準品,培養基,抗體,分子生物學,細胞,耗材
鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
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MEI培養基Sandwich ELISA, Double Antibody亮酰-半胱酰肽酶檢測試劑盒天青II2-8 ℃ for 6 monthsT4 DNA連接酶/T4 DNA Ligase
鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 產品信息

產品名稱:鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
貨號:XG01P4332
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

 


實時定量PCR:
①β-actin陽性模板的標準梯度制備 陽性模板的濃度為1011,反應前取3μl按10倍稀釋(加水27μl并充分混勻)為1010,依次稀釋至109、108、107、106、105、104,以備用。
②反應體系如下:
標準品反應體系
序號  反應物  劑量
1   SYBR Green 1 染料  10μl
2  陽性模板上游引物F  0.5μl
3  陽性模板下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  陽性模板DNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合,6000rpm短暫離心。

基因反應體系:
序號  反應物  劑量
1  SYBR Green 1 染料  10μl
2  內參照上游引物F  0.5μl
3  內參照下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  待測樣品cDNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合,6000rpm短暫離心。
③制備好的陽性標準品和檢測樣本同時上機,反應條件為:93℃ 2分鐘,然后93℃ 1分鐘,55℃ 2分鐘,共40個循環。
PCR特異性:
1.primers design
這是重要的一步。理想的,只同目的序列兩側的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面一些條件:
1)足夠長,18~24bp,以保證特異性,當然,不是說越長越好,太長的primer同樣會降低特異性,并且降低產量;
2)GC%,40%~60%;
3)5'端和中間序列要多GC,以增加穩定性;
4)避免3'端GCrich,個BASE不要有GC,或者5個有3個不要是GC。
5)避免3'端的互補,否則,容易造成DIMER;
6)避免3'端的錯配;
7)避免內部形成二級結構;
8)附加序列(RT site,Promoter sequence)加到5'端,在算Tm值時不算,但在檢測互補和二級結構要加上它們;
9)使用兼并primer時,要參考密碼子使用表,注意:生物偏好性,不要在3'端使用兼并primer,并使用較高的primer濃度(1μM~3μM);
10)學會使用一種design software,PP5,Oligo6,DNA star,Vector NTI,Online design et al。

小鼠成纖維細胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

桿菌屬 Lactobacillus sp.膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum

成人表皮角化細胞*培養基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

植物桿菌 Lactobacillus plantarum粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠前列腺上皮細胞*培養基

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

人椎間盤髓核細胞*培養基RLFs, 大鼠肺成纖維細胞

尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

小鼠腸上皮細胞*培養基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

桿菌屬 Lactobacillus sp.光滑青霉 Penicillium glabrum

EB-3(人Burkitt淋巴瘤細胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

植物桿菌 Lactobacillus plantarum粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種 Bacillus thuringiensis subsp. KenyaeHCT-8/結腸細胞
鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒D-苯甘氨甲酯鹽鹽

D-苯甘氨甲酯鹽鹽

2-氟-L-苯丙氨

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Atazanavir

9,9-辛基-2,7-溴基芴

9,9-辛基-2,7-溴基芴

(R)-(+)-3-羥基啶鹽鹽

(R)-(+)-3-羥基啶鹽鹽

FMOC-L-4-基苯丙

熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

關鍵詞:分光光度計
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