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胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

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公司名稱上海西格生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號50T
所在地上海市
廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
更新時間2020/10/15 14:07:13
訪問次數(shù)254

產(chǎn)品標(biāo)簽:

胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

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公司介紹主營產(chǎn)品

上海西格生物科技有限公司（Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd）是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。

上海西格生物科技有限公司（Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd）先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對各種動物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。

公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù)，力求為我國科研事業(yè)更好的，更專業(yè)的服務(wù)！

公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換，有技術(shù)疑問可隨時給于解答，一對一的客服服務(wù)，客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。

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生化試劑，ELISA試劑盒，血清，標(biāo)準(zhǔn)品，培養(yǎng)基，抗體，分子生物學(xué)，細(xì)胞，耗材

產(chǎn)品簡介在線詢價

胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
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奈素
芍藥內(nèi)酯苷
水仙苷

胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒產(chǎn)品信息

PCR特異性：
1.primers design
這是重要的一步。理想的，只同目的序列兩側(cè)的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面一些條件：
1)足夠長，18～24bp，以保證特異性，當(dāng)然，不是說越長越好，太長的primer同樣會降低特異性，并且降低產(chǎn)量；
2)GC%，40%~60%；
3)5'端和中間序列要多GC，以增加穩(wěn)定性；
4)避免3'端GCrich，個BASE不要有GC，或者5個有3個不要是GC。
5)避免3'端的互補，否則，容易造成DIMER；
6)避免3'端的錯配；
7)避免內(nèi)部形成二級結(jié)構(gòu)；
8)附加序列(RT site，Promoter sequence)加到5'端，在算Tm值時不算，但在檢測互補和二級結(jié)構(gòu)要加上它們；
9)使用兼并primer時，要參考密碼子使用表，注意：生物偏好性，不要在3'端使用兼并primer，并使用較高的primer濃度(1μM～3μM)；
10)學(xué)會使用一種design software，PP5，Oligo6，DNA star，Vector NTI，Online design et al。

產(chǎn)品名稱：胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：
貨號：XG01P4290
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液濃度和純度。
實時定量PCR：
①β-actin陽性模板的標(biāo)準(zhǔn)梯度制備陽性模板的濃度為1011，反應(yīng)前取3μl按10倍稀釋（加水27μl并充分混勻）為1010，依次稀釋至109、108、107、106、105、104，以備用。
②反應(yīng)體系如下：
標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)體系
序號反應(yīng)物劑量
1 SYBR Green 1 染料 10μl
2 陽性模板上游引物F 0.5μl
3 陽性模板下游引物R 0.5μl
4 dNTP 0.5μl
5 Taq酶 1μl
6 陽性模板DNA 5μl
7 ddH2O 32.5μl
8 總體積 50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。

宋氏志賀氏菌 Shigella sonneiAcc-2(人涎腺腺樣囊性細(xì)胞)

人腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基小鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

巴固氮螺菌 Azospirillum brasilenseGBC-SD(人膽囊細(xì)胞)

人氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基紫紅曲霉 Monascus purpureus

Tris(三羥甲基氨基甲烷)玉米桿菌 Lactobacillus zeae

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii愛媛鏈輪絲菌 Streptomyces ehimense

BC-019(人腺細(xì)胞)暫無 Escherichia coli

HA Tag IP/Co-IP Kit/HA標(biāo)簽免疫沉淀試劑盒苜蓿中華根瘤菌

酒假絲酵母 Candida kefyrA2780(人卵巢細(xì)胞)

人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基大鼠宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

假單胞菌 Pseudomonas sp.EL4(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)

少根根霉 Rhizopus arrhizus紅曲霉 Monascus anka

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae黑曲霉 Aspergillus niger
胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒1-Boc-3-氨基吡咯烷

5-溴-4--3-吲哚基-β-D-葡萄糖苷環(huán)己基鹽

5-溴-2,3-氟

S-化丁酰硫代膽

4-甲基肉桂

基因反應(yīng)體系：
序號反應(yīng)物劑量
1 SYBR Green 1 染料 10μl
2 內(nèi)參照上游引物F 0.5μl
3 內(nèi)參照下游引物R 0.5μl
4 dNTP 0.5μl
5 Taq酶 1μl
6 待測樣品cDNA 5μl
7 ddH2O 32.5μl
8 總體積 50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。
③制備好的陽性標(biāo)準(zhǔn)品和檢測樣本同時上機(jī)，反應(yīng)條件為：93℃　2分鐘，然后93℃ 1分鐘，55℃ 2分鐘，共40個循環(huán)。