迷宮實驗儀器
(elevated plus-maze test, EPM)
一.實驗原理
嚙齒類動物具有探究新環境的習性,但是又厭惡強光和開闊地。EPM 就是利用嚙齒類動物對新異環境的探究行為和對高懸著的開臂的恐懼形成的矛盾沖突狀態,評價藥物的抗焦慮或致焦慮作用。EPM 初是由 Montgomery 在 1955 年的工作發展而來的。Pellow 等人根據研究需要設計出了具有兩個開臂和兩個閉臂的迷宮,并將迷宮抬高借以增加動物進入開臂時的恐懼。迷宮是一個簡單、快速、結果重復性好的焦慮檢測模型,因此廣泛應用于抗焦慮藥物的研究與開發。
二.實驗裝置
迷宮實驗儀器可以是木質結構,現在多為無味的塑料材質,顏色為黑色。迷宮包括 50cm*10cm 的兩個相對開臂(open arm)和兩個50cm*10*40cm 的相對閉臂(closed arm),閉臂的上部是敞開的。迷宮*有一 10cm*10cm的開闊部,迷宮距離地面 50cm 高。迷宮上方安裝錄監控器,以錄制動物在迷宮中的活動情況,以供日后分析使用。
三.實驗方法
1. 在實驗前一個星期,每天撫摸實驗動物 1-5min,連續 7 天,借以消除實驗動物對實驗者的恐懼。
2. 將實驗動物放入迷宮*區,頭朝開臂,并注意此后每只實驗動物均放在同一位置。同時開啟攝像監控器記錄 5min 內實驗動物開臂和閉臂的進入次數及進入各臂的時間。實驗過程中實驗者需距離迷宮 1 米的距離。
3. 記錄結束后將實驗動物放回飼養籠具內。同時清理迷宮,并用 5%的醋酸水溶液或 75%的酒精擦拭迷宮,借以消除動物氣味對后繼實驗動物的影響。
四.實驗數據
主要應用的實驗數據:
1.開臂進入次數百分比= 開臂進入次數/開臂進入次數+閉臂進入次數
2.開臂滯留時間百分比= 開臂滯留時間/開臂滯留時間+閉臂滯留時間
此兩指標作為評價焦慮的指標,通常這兩個指標高度相關。如果一個藥物增加動物對開臂的偏愛(即增加進入開臂的次數和在開臂內滯留時間),卻不改變入臂總次數和入臂總時間,也即開臂進入次數百分比和開臂滯留時間百分比升高,則認為該藥物具有抗焦慮的作用。相反一個藥物如果減少實驗動物對開臂的偏愛,而入臂總次數和入臂總時間不變,則認為該藥物具有致焦慮的作用。
五.注意事項
1. 為了提高大鼠入臂總次數,避免大鼠總是躲在閉臂中,通常在測試前先將大鼠放在開闊場地(open field)中適應 5min 后再放入迷宮。
2. 實驗前一周每天撫摸大鼠可以明顯減少大鼠對實驗者的恐懼感以及無關刺激對迷宮中大鼠的影響。
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