微量分光光度計 按數(shù)字[3]鍵進(jìn)入③Concentration (濃度測定模式或標(biāo)準(zhǔn)曲線模式)，選中對應(yīng)的數(shù)字來設(shè)定條件(波長數(shù)目，波長數(shù)值，標(biāo)準(zhǔn)溶液數(shù)目及濃度)，設(shè)定完畢后點(diǎn)擊[Enter]鍵確定，所有項目設(shè)定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定，等待儀器調(diào)整至準(zhǔn)備狀態(tài)，此時屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO，將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中，按[Start/Stop] 鍵進(jìn)行零點(diǎn)的自動調(diào)整，自動調(diào)零完成后，將標(biāo)準(zhǔn)溶液置于光路中，按照濃度從低到高順序依次按[Start/Stop] 鍵進(jìn)行測量，
微量分光光度計
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r操作。
核酸的定量是分光光度計使用頻率高的功能?？梢远咳苡诰彌_液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一，因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應(yīng)的系數(shù)。如：1OD 的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。
測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。測試前，選擇正確的程序，輸入原液和稀釋液的體積，爾后測試空白液和樣品液。然而，實(shí)驗(yàn)并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實(shí)驗(yàn)者頭痛的問題。靈敏度越高的儀器，表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。
