構建人白細胞介素32γ(IL-32γ)基因重組腺病毒載體,并檢測其在HEK293細胞中的表達.方法從表達質粒pDONR223中擴增目的片段IL-32γ,定向克隆至穿梭載體pShuttle-GFP-CMV獲得pShuttle-(ΔGFP)-IL-32γ,經I-CeuI+I-SceI雙酶切處理后轉移至腺病毒載體pAdxsi,得到Ad-IL-32γ進行PCR鑒定及滴度測定.將Ad-IL-32γ轉染至人胚腎細胞HEK293中,通過觀察綠色熒光蛋白(GFP)確定Ad-IL-32γ的轉染效率,并通過Western印跡檢測目的基因IL-32γ的表達.結果目的片段IL-32γ轉入穿梭載體后,酶切鑒定pShuttle-(ΔGFP)-IL-32γ正確.酶切穿梭載體將目的基因片段克隆至腺病毒載體pAdxsi得到Ad-IL-32γ病毒載體,酶切鑒定證實構建成功.Ad-IL-32γ病毒滴度為2×1010pfu/ml.轉染HEK293細胞通過觀察GFP判斷轉染效率,并通過Western印跡證實其在HEK293中的表達.結論成功構建IL-32γ重組腺病毒載體并證實其能在體外有效表達IL-32γ蛋白,為進一步基于Ad-IL-32γ的基因治療研究奠定基礎.
廈門侖昌碩生物科技有限公司集研發、生產、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術公司，目前可提供各種抗體、免疫學相關的檢測試劑盒、胎牛血清，動物抗血清等高品質產品及服務，涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領域。
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人白細胞介素32γ（IL-32γ）elisa試劑盒 產品信息
