目的在甲醇營養型畢氏酵母蛋白質表達系統中高效表達人白細胞介素-11(rhIL-11),便于進一步開發.方法以人工設計合成的rhIL-11基因,構建表達載體pPICZαA-IL-11,經線性化后電轉化導入畢氏酵母菌株KM71,甲醇誘導表達,用ELISA和SDS-PAGE檢測發酵上清中IL-11的抗原性和表達量,用IL-11依賴的B9-11細胞株分析其生物學活性,采用疏水層析,離子交換和凝膠過濾純化發酵上清中的IL-11.結果序列分析表明,克隆載體中IL-11人工基因序列與設計相符;基因工程菌株KM71-2424在搖瓶培養上清中IL-11的表達量超過60mg/L,生物學活性測定顯示其比活性為5.5×107U/mg,而標準品的生物學活性為2.2×107 U/mg.經過三步層析純化得到電泳純的rhIL-11蛋白質.結論成功獲得IL-11人工基因和穩定分泌重組蛋白的基因工程菌株KM71-2424,該重組蛋白的生物學活性顯著高于大腸桿菌表達的標準品,并獲得較高純度的重組蛋白
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人白細胞介素11(IL-11)elisa試劑盒 產品信息