一、服務(wù)介紹
細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征,細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。通過細(xì)胞分裂,可以將復(fù)制的遺傳物質(zhì),平均地分配到兩個(gè)子細(xì)胞中去。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)包括MTT法和CCK8法。
CCK-8常應(yīng)用于檢測細(xì)胞的增殖能力。CCK-8試劑中含有WST–8:化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪*(1-Methoxy PMS)的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定其吸光度值(OD值)來判斷活細(xì)胞數(shù)量,OD值越大,細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越?。?。
MTT常應(yīng)用于檢測細(xì)胞的增殖能力,其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan),并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶標(biāo)儀在490nm波長處測定其吸光度值(OD值),在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值)來判斷活細(xì)胞數(shù)量,OD值越大,細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。
二、服務(wù)流程
1、細(xì)胞培養(yǎng)
2、藥物處理
3、試劑處理
4、測定吸光度
5、撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告
三、客戶提供
1、培養(yǎng)好的細(xì)胞(大于106)以及所需藥品。
2、藥物作用方式(藥物濃度、時(shí)間等)。
四、交付內(nèi)容
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:詳細(xì)操作步驟、統(tǒng)計(jì)分析。