WarRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000×in Water) 

— EB核酸染料的無毒替代品 

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

WarRed是一種*的油性大分子，不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。不易揮發(fā)升華，人體不會(huì)吸入。艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果也表明WarRed在凝膠染色濃度下*無誘變性，相對(duì)于EB的強(qiáng)致癌性是一種安全無毒的核酸染料。WarRed與EB具有相同的光譜特性，無需改變?yōu)V光片及觀察裝置（普通紫外凝膠透射儀），在300nm處紫外光激發(fā)檢測(cè)即可。WarRed適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA,ssDNA以及RNA染色，可以選擇膠染法或泡染法進(jìn)行染色，使用非常方便和靈活。

使用方法

一、膠染法（同EB，電泳前染色）

1) 制膠時(shí)加入WarRed 核酸染料（每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL WarRed10,000×水溶液）。

2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

注意事項(xiàng)

1）此方法比較節(jié)省染料，500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。

2) 由于WarRed具有良好的熱穩(wěn)定性，可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將WarRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中，然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。

3）WarRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

4）含有染料的預(yù)制凝膠溶液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。

5）如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在，則說明問題與染料無關(guān)，請(qǐng)嘗試：降低瓊脂糖濃度；選用更長(zhǎng)的凝膠；延長(zhǎng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰；改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。

6）膠染法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠，對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。

二、泡染法（電泳后染色）

1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

2. 用H₂O將WarRed 10,000×水溶液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中，制成3× 染色液。（如將15μL WarRed10,000×水溶液和  5mL 1M NaCl加到45mL H₂O中）。

3.將凝膠小心地放入合適的容器中，緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右，zuijia染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚  度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5～10％聚丙烯酰胺的凝膠，染色時(shí)間通常介于30min到1h，并隨聚丙烯酰胺含  量增加而延長(zhǎng)。

注意事項(xiàng)

1）用泡染法染色時(shí)，染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。

2）3×WarRed染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。

 特別注意事項(xiàng)

1) 關(guān)于核酸染料相關(guān)產(chǎn)品的選擇：

   如果您使用紫外成像儀，建議選擇WarRed-EB核酸染料的無毒替代品，具有同EB相同的光譜特性；如果您      使用激光成像儀或希望在可見光下觀測(cè)，請(qǐng)選擇WarGreen，在凝膠染色中是SYBR Green I的*替代品，安全無毒。WarGreen     雖然具SYBR Green I 相似的光譜特性，且在凝膠染色方面效果優(yōu)于SYBR Green I，但不建議用于qPCR。建議使用專為此用途      設(shè)計(jì)的SUPER Green I 和RTGreen。

2) 極少數(shù)情況下，質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會(huì)出現(xiàn)拖尾和分辨率降低的問題，此時(shí)建議同時(shí)嘗試兩種染色方法以決定哪種       方法更適合。

3 )為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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