中文名:人巨噬細胞活化因子(MAF)ELISA試劑盒
英文名:Human macrophageactivatingfactor,MAF Elisa Kit
別名:人巨噬細胞活化因子(MAF)ELISA Kit
供應商:博研生物
規格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
預期應用:ELISA法定量測定人血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中MAF含量。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本,例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
操作步驟:
1,試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。
2,實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3,不用的其它試劑應包裝好或蓋好。
4,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6,洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
8,嚴格按照說明書的操作方法進行操作。說明書以英文說明書為主。
人巨噬細胞活化因子(MAF)ELISA試劑盒標本的采集及保存:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃ 后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
實驗準備:
1. ELISA試劑盒及待測樣本
2. 酶標儀(450nm波長濾光片)
3. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
5. 吸水紙
優雙抗體夾心法(檢測未知抗原):
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
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試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R 值為0.990 以上。
2.批內與批見應分別小于9%和11%。